自制脂質納米泡用于體內外超聲造影顯像及介導細胞基因轉染的實驗研究.pdf

1、第一部分自制陽離子納米泡介導HepG2細胞基因轉染的實驗研究
　　目的:觀察自制陽離子納米泡作為基因轉染載體體外轉染肝癌細胞系HepG2細胞的可行性。
　　方法:將脂質體、聚乙烯亞胺(PEI)和全氟丙烷聲震后制得殼膜帶有PEI的陽離子脂質體納米泡(PNB),評價其基本特性,用其轉染HepG2細胞,并輻照超聲,熒光顯微鏡觀察綠色熒光蛋白表達情況,流式細胞儀檢測細胞轉染率,CCK-8法評估其細胞活性。
　　結果:制備的PN

2、B表面帶有正電荷,能夠阻礙質粒DNA在電場作用下發(fā)生遷移,且能夠有效地轉染HepG2細胞,轉染效率達30％-45%,輻照超聲后轉染效率明顯提高(P<0.05)。
　　結論:新型陽離子納米泡在體外可作為基因轉染載體,有效地攜帶質粒DNA并促進轉染,輻照超聲可使轉染效率顯著提高。
　　第二部分自制脂質納米泡體內外超聲造影顯像實驗研究
　　目的:探討自制脂質納米泡體內外超聲造影增強顯影效果。
　　方法:通過反相蒸發(fā)法制

3、備脂質體并用聲震法制得脂質納米泡,對其粒徑大小、形態(tài)、zeta電位等進行檢測。將納米泡/常規(guī)造影劑(SonoVue)均分別按照殼膜質量濃度和氣泡濃度稀釋成相同濃度后觀察二者的體外顯像效果差異。納米泡/SonoVue用同等氣泡濃度對裸小鼠肝臟及皮下移植瘤行超聲造影成像,對比造影效果。
　　結果:所制備的納米泡大小均一性好,無明顯聚集,平均粒徑為(424.46±89.32)nm,濃度為(6.0~9.0)×109個/ml。在相同的殼膜質

4、量濃度下自制納米泡顯影強度明顯高于SonoVue,差別有統(tǒng)計學意義(p<0.01)。脂質納米泡和SonoVue都能達到較好的體外顯影效果,各相同氣泡濃度組的納米泡與SonoVue增強顯影強度間差別無統(tǒng)計學意義(p>0.05)。裸小鼠尾靜脈注射后能夠顯著增強其肝臟和皮下移植瘤顯影,與SonoVue相比達峰時間延遲,顯影時間顯著延長。
　　結論:本研究成功制備了納米級超聲微泡造影劑,脂質原材料利用率高,在體外及裸鼠肝臟和皮下移植瘤均具