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文檔簡介
1、目的：本實驗主要觀察HSP27對THP-1巨噬細胞源性泡沫細胞三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1（ABCA1）的表達和細胞內(nèi)膽固醇流出的影響，并探討其相關機制。
方法：將THP-1細胞中加入佛波酯，同時用ox-LDL孵育使之轉(zhuǎn)變成泡沫細胞，并加入HSP27（不同濃度）以及siRNA即小分子干擾RNA等因素處理后，采用Western blot和半定量RT-PCR檢測ABCA1蛋白質(zhì)的表達和mRNA表達，采用高效液相色譜法檢測細胞內(nèi)總膽固
2、醇，游離膽固醇和膽固醇酯含量，使用液體閃爍計法檢測細胞內(nèi)膽固醇流出。以PI3K抑制劑或PKCζ阻斷劑或SP1抑制劑對HSP27作用下的細胞共處理24小時，觀察對ABCA1表達的影響。不同形式HSP27處理THP-1巨噬細胞源性泡沫細胞24h，Western blot檢測HSP27對PKCζ和SP1磷酸化水平的影響。
結(jié)果： HSP27上調(diào)ABCA1的表達，增加細胞內(nèi)膽固醇流出，從而減少細胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積；3D HSP27增加PI3
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