從噬菌體展示隨機肽庫中淘選多肽藥物

1、北京大學政學者論文集（2002年）從噬菌體展示隨機肽庫中淘選藥物454從噬菌體展示隨機肽庫中淘選多肽藥物從噬菌體展示隨機肽庫中淘選多肽藥物ionofPeptidedrugsfromPhagedisplayedRomPeptideLibrary生命科學學院99級沈抒殫摘要摘要以凝血酶為靶分子，利用噬菌體展示和親和淘選技術，從隨機十五肽庫中篩選到結合凝血酶的3個特異結合肽克隆，并對其中結合活性最強的短肽進行了序列測定。ELISA鑒定結果表

2、明，3個克隆對于凝血酶都有一定的結合能力，且都與凝血酶的天然抑制劑水蛭素產生競爭。關鍵詞關鍵詞：噬菌體展示，隨機肽庫，淘選，凝血酶AbstractAbstractThrombinastargetmoleculewiththenewbiotechniqueofphagedisplaybiopanning3specialbindingpeptidecloneswereedoutfromaphagedisplayedrom15peptidel

3、ibrary.Thesequenceoftheclonewhichhadthehighestaffinitywiththrombinhasbeendetermined.DataofELISAshowedthatallthethreeclonescouldbecombinedtothrombintosomeextent.allofthemcouldcompetewithhirudinwhichisthenaturalinhibitofth

4、rombin.Keywds:phagedisplayrompeptidelibrarybiopanningthrombin一、前言噬菌體展示隨機多肽庫噬菌體展示隨機多肽庫技術是以噬菌體展示技術（phagedisplay）為基礎北京大學政學者論文集（2002年）從噬菌體展示隨機肽庫中淘選藥物456異結合的多肽。在理論上可以通過對凝血酶結合多肽的序列性質分析來研究凝血酶受體的可能性質；在應用上通過對凝血酶結合肽的研究可以期望進一步找出有效

5、的抗血栓藥，具有一定的實際意義。二、實驗材料（一）菌株大腸桿菌(Escherichiacoli)TG1，輔助噬菌體M13KO7均為本實驗室保存。（二）主要試劑噬菌體展示十五肽庫為本實驗室構建（庫容量1.36108），凝血酶購自Pharmacia公司，粗制牛凝血酶為天津血液所產品，凝血酶底物ChromzymTH購自BoehringerMannheim公司，HRP－M13抗體購自華美公司，96孔酶標板為Nunc公司產品ELISA試劑均為華美

6、公司產品。主要溶液的配制：PBS：1PBS：133mmollNaCl3mmolLKCl8mmolLNa2HPO41.5mmolLKH2PO410PBS：80.0gNaCl2.0gKCl11.5gNa2HPO47H2O20.0gKH2PO4溶于1升H2O中，調至pH7.5，高壓滅菌。PBSTween20(PBST)：1升1PBS中加入1ml吐溫（Tween）－20。PBSM:100mlPBS中加入2g脫脂奶粉，離心取上清。50mmolL甘