ubi-1啟動子驅動的花生芪合酶基因植物表達載體的構建及玉米遺傳轉化研究.pdf

1、甘肅農業(yè)大學碩士學位論文ubi-1啟動子驅動的花生芪合酶基因植物表達載體的構建及玉米遺傳轉化研究姓名：郭志鴻申請學位級別：碩士專業(yè)：作物遺傳育種指導教師：王漢寧20040601載體p B I U A 。采用基因槍法分別對玉米優(yōu)良自交系綜3 1 和鄭2 2 的I I 型胚性愈傷組織進行了遺傳轉化研究，初步得出基因槍法轉化玉米I I 型愈傷組織的優(yōu)化參數(shù)為：金粉用量為6 0 ug ／B ，轟擊次數(shù)為兩次，發(fā)射點與靶細胞的距離為9 c m 時

2、，轉化效率高而且經濟。對玉米再生體系的研究得出：胚齡對胚性愈傷組織的誘導率影響較大，授粉后1 0 天左右的幼胚形成愈傷組織的能力最強，過大或過小都不利于胚性愈傷組織的誘導；培養(yǎng)基中2 , 4 ．D 的濃度對胚性愈傷組織的誘導影響極大，且不同的基因型，其最大胚性愈傷組織誘導率所需2 , 4 ．D 濃度也不一樣，其中有利于“綜3 1 ”形成愈傷的2 , 4 一D 最適使用濃度為1 ．5 m g ／L ，“鄭2 2 ”為2 ．0 m g ／L

3、 。此外，玉米I I 型胚性愈傷組織分化成苗時不同基因型所需的最適6 一B A 濃度也不同，“綜3 1 ”和“鄭2 2 ”愈傷組織分化成苗的最適6 一B A 濃度分別為1 ．0 m g ／L 和O ．5 m g ／L 。以優(yōu)化的基因槍轉化再生體系對這兩個自交系幼胚進行了大批量轉化，最終獲得了6 株再生植株。資料檢索結果表明，到目前為止尚未有將芪合酶基因導入玉米的報道。關鍵詞： 花生芪合酶玉米泛素蛋白啟動子及5 ’U T R 基因槍轉化法