血管緊張素-（1-7）對血管緊張素Ⅱ誘導的臍靜脈內皮細胞ICAM-1和VCAM-1的影響.pdf

1、背景和目的: 目前認為，動脈粥樣硬化(AS)是一種慢性炎癥過程。內皮細胞損傷和單核細胞與內皮細胞黏附是AS發(fā)生的重要始動環(huán)節(jié)。細胞間黏附分子-1(intercellular adhesion molecLlle-1，ICAM-1)和血管細胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molectlle-1， VCAM-1)是存在于內皮細胞表面的一種重要的黏附分子，主要介導單核細胞與內皮細胞黏附，從而引發(fā)動脈粥樣硬

2、化。血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)是腎素-血管緊張素系統的重要活性物質，研究表明AngⅡ可刺激內皮細胞ICAM-1和VCAM-1的表達，在AS的發(fā)生中起關鍵作用。血管緊張素-(1-7)[Ang-(1-7)]是腎素-血管緊張素系統的新成員，具有降低血壓、抗增生、利鈉利尿等拮抗AngⅡ的作用。但Ang-(1-7)能否對抗AngⅡ刺激內皮細胞表達粘附分子的作用，國內外未見相關文獻報道。本實驗通過體外培養(yǎng)的臍靜脈內皮細胞，采用ELISA法和半定量RT

3、-PCR法從蛋白和mRNA水平檢測ICAM1-和VCAM-1的表達，觀察Ang-(1-7)對AngⅡ誘導的臍靜脈內皮細胞黏附分子的影響。闡明Ang-(1-7)對AngⅡ在炎癥方面的拮抗作用，揭示Ang-(1-7)拮抗AngⅡ作用的另一新途徑，為臨床心血管疾病的防治提供理論依據。 方法: 1、臍靜脈內皮細胞培養(yǎng)鑒定。 2、試驗分組 (1)對照組培養(yǎng)液不加干擾因素；(2)Ang Ⅱ組加入Ang Ⅱ 100nmol/L

4、；(3)Ang-(1-7)組力口入Ang-(1-7)1000nmol/L；(4)Ang Ⅱ+Ang-(1-7)組分別用Ang-(1-7)10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L、10000nmol/L預處理30min后，再力口入Ang Ⅱ 100nmol/L；(5)Ang Ⅱ+Ang-(1-7)+A-779組先用1000nmol/L A-779預處理30min后，再用終濃度為1000nmol/L Ang-(1-7)預處

5、理30min，最后加入終濃度1 00nmol/L Ang Ⅱ。 3、各組用ELISA法和半定量RT-PCR法從蛋白和mRNA水平檢測ICAM-1和VCAM-1的表達情況。 結果: 1、正常細胞生長良好，呈鵝卵石樣鑲嵌排列，細胞透明度大，輪廓不清。熒光免疫組化染色法，可檢測到培養(yǎng)的HUVEC的VⅢ因子相關抗原為陽性。 2、與對照組比，AngⅡ(100lamol/L)使ICAM-1和VCAM-1的分泌量明顯增

6、加，ICAM-1和VCAM-1 mRNA的表達顯著升高(P<0.05)：Ang-(1-7)(1000nmol/L)使ICAM-1和VCAM-1的分泌量降低，ICAM-1和VCAM-1 mRNA表達亦降低(P<0.05)； 3、混合刺激組中，與Ang Ⅱ組比較，Ang-(1-7) (10nmol/L、100nmol/L、1000nmol/L、10000 nmol/L)呈劑量依賴性的抑制Ang Ⅱ刺激ICAM-1、VCAM-1的分泌

7、和ICAM-1、VCAM-1 mRNA的表達(P<0.05)，Ang-(1-7)濃度為1000nmol/L時，雖然蛋白和mRNA表達仍高于對照組，但無統計學意義(P>0.05)； 4、加入A-779后，Ang-(1-7)的作用消失。 結論: 1、AngⅡ可使內皮細胞ICAM-1和VCAM-1的分泌量明顯增加。 2、Ang-(1-7)可使內皮細胞ICAM-1和VCAM-1的分泌量減低。 3、Ang-