α-淀粉酶抑制劑的提取、分離及性質研究.pdf

1、α-淀粉酶抑制劑(α—amylase inhibitor)是一類能抑制消化道中糖類吸收的物質的統(tǒng)稱,它是通過抑制和降低腸道內唾液淀粉酶及胰淀粉酶的活性,阻礙食物中碳水化合物的水解和消化,從而達到減少人體對糖分的攝取,降低人體血液中糖、脂含量的目的。目前,α-淀粉酶抑制劑在醫(yī)藥和農業(yè)等領域具有廣泛的用途。臨床醫(yī)學上它是防治糖尿病、高血糖、高血脂等病的良好藥物；農業(yè)上,可將淀粉酶抑制劑基因作為抗蟲基因,或者將其制成生物農藥；在酶學研究方面,

2、它可作為探究α-淀粉酶活性部位的分析工具或測定α-淀粉酶同工酶的反應物。因此,α-淀粉酶抑制劑應用前景十分廣闊。
　　 本實驗以白蕓豆和小麥麩皮為原料提取分離純化α-淀粉酶抑制劑,對其工藝條件進行了研究。結果表明:小麥麩皮:水=1:8(100g小麥麩皮,800mL純凈水),浸泡時間2h,添加0.2mol/L的NaCl助溶,并以70％硫酸銨沉淀蛋白,再經超濾膜和冷凍干燥處理,最終得到2.072g粉末,總蛋白含量201mg,比活力為

3、103U/mg,總抑制活力為20720U,收率為41.74％。該抑制劑在pH4-11時較穩(wěn)定；在80℃下作用30min酶活性喪失10％左右。白蕓豆:水=1:8(100g白蕓豆,800mL純凈水),24h浸泡過夜,粉碎攪拌4h,添加0.2mol/L的NaCl助溶,得出1.84g干燥樣品,配置成濃度為5mg/ml的溶液,比活力為22.2U/mg,總活力為33488U,最終抑制收率為71.9％。該抑制劑在pH3-10時較穩(wěn)定,80℃下相對穩(wěn)定

4、。
　　 SDS凝膠電泳測定得出,麩皮α-AI得到三條蛋白質條帶,分子量分別是33kD,30kD,26kD；白蕓豆α-AI得到兩條蛋白質條帶,分子量分別為35kD,30kD。對兩種α-淀粉酶抑制劑抑制動力學試驗表明:小麥麩皮α-淀粉酶抑制劑對α-淀粉酶的抑制類型為混合非競爭性抑制類型,抑制常數為3.47mg/mL；白蕓豆α-淀粉酶抑制劑對α-淀粉酶的抑制屬于不可逆抑制。
　　 本實驗還做了較大規(guī)模的小麥麩皮中α-淀粉酶抑