CD88和COX-2在肝細胞肝癌中表達的相關(guān)性及其意義.pdf

1、目的：
　　目前，癌癥已經(jīng)成為人類健康的第一殺手，尤其是肝細胞肝癌(Hepatocellularcarcinoma，HCC)，在中國甚至世界范圍內(nèi)，發(fā)病率和死亡率在逐年升高。因此，尋找新的診斷和治療相關(guān)分子協(xié)助臨床醫(yī)生快速有效地診斷和治療HCC將有利于提高HCC病人的療效和生存率。環(huán)氧合酶(cyclooxygenase，COX)在體內(nèi)有著重要的作用，近年來的研究表明，Ⅱ型環(huán)氧合酶(COX-2)在食管癌、肝癌中表達增高，與腫瘤血管的

2、形成密切相關(guān)。CD88又稱補體5片段受體(complement component5areceptor，C5aR)，常被用來作為鑒定白細胞系的標(biāo)志，與C5a結(jié)合后能夠激活PI3K/AKT/mTOR和IL-6/STAT3兩個信號通路并促進肝細胞的分裂增殖和對抗凋亡，趨化白細胞和參與炎癥反應(yīng)，在腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移中發(fā)揮重要作用。已有研究顯示CD88可能促進腫瘤周圍血管新生，加速腫瘤細胞侵襲轉(zhuǎn)移。由于COX-2和CD88在腫瘤組織中的表達均顯著增高

3、，并且與腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，因此，本研究將探討二者在肝細胞肝癌組織中的表達率以及二者之間的相關(guān)性。
　　方法：
　　1.標(biāo)本收集
　　收集新鄉(xiāng)市第一人民醫(yī)院病理科2013年1月至2014年4月期間，所有資料完整的肝細胞肝癌組織共57例。根據(jù)年齡、性別、腫瘤直徑、分化程度、分期和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等將標(biāo)本分類。一部分組織放入液氮保存，另一部分組織經(jīng)10％的福爾馬林溶液固定、石蠟包埋以及4μm厚度連續(xù)切片。
　　2.

4、RT-PCR檢測正常肝組織和肝細胞肝癌組織中COX-2和CD88mRNA的表達
　　提取肝正常組織和肝細胞肝細胞肝癌組織中總mRNA，檢測組織中COX-2和CD88 mRNA的表達情況。
　　3.免疫組織化學(xué)染色觀察COX-2和CD88蛋白的表達
　　將準(zhǔn)備好的組織切片用SABC法進行免疫組織化學(xué)染色，觀察并確定COX-2和CD88的表達部位，計算二者的表達率以及表達的相關(guān)性。
　　4.結(jié)果判斷
　　RT-

5、PCR的結(jié)果用Image J軟件測量灰度值，根據(jù)與內(nèi)參的對比，判斷COX-2和CD88 mRNA的表達。免疫組織化學(xué)結(jié)果根據(jù)染色強度和陽性細胞所占的百分比分別計分，再將染色強度分值與陽性細胞所占百分比分值相乘所得乘積判定染色結(jié)果。
　　5.統(tǒng)計學(xué)處理
　　計量數(shù)據(jù)均使用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（(x)±s）表示，應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)處理。多樣本均數(shù)的比較采用方差分析;陽性率的比較用x2檢驗;相關(guān)性分析用Pears

6、on檢驗，檢驗水準(zhǔn)均設(shè)為α=0.05，即P＜0.05有顯著統(tǒng)計學(xué)差異，P＜0.01有非常顯著統(tǒng)計學(xué)差異，P＞0.05無統(tǒng)計學(xué)差異。
　　結(jié)果：
　　1.COX-2和CD88 mRNA的表達
　　COX-2和CD88 mRNA在正常肝組織和肝細胞肝癌組織中均有表達，且在肝細胞肝癌組織的表達較正常肝組織明顯增高。二者在低、中、高分化癌組織中表達逐漸增高，低、中分化組表達無統(tǒng)計學(xué)差異，而二者與高分化組相比有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0

7、.05)。
　　2.COX-2在肝細胞癌中的表達及與臨床病理特征的關(guān)系
　　COX-2染色陽性的細胞其細胞漿中呈現(xiàn)彌漫性分布的黃色和棕黃色顆粒狀物質(zhì)，肝細胞癌組織中的COX-2陽性率為73.68％。COX-2蛋白的表達與腫瘤分化程度、腫瘤大小、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況無關(guān)(P＞0.05)。
　　3.CD88在肝細胞癌中的表達及與臨床病理特征的關(guān)系
　　CD88蛋白表達主要位于細胞膜，部分位于胞漿中。肝細胞癌組織中

8、的CD88蛋白表達的陽性率為82.45％。CD88蛋白的表達與腫瘤分化程度、腫瘤大小、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況無關(guān)(P＞0.05)。
　　3.COX-2與CD88在肝細胞癌中的表達的相關(guān)性
　　肝癌組織中，COX-2陽性組，CD88的陽性率為90.48％，顯著高于COX-2陰性組(60％)，COX-2和CD88的蛋白表達呈正相關(guān)(r=0.353，P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.肝細胞肝癌組織中COX-2和C