姜黃素誘導肺腺癌細胞的凋亡機制研究.pdf

1、本論文通過研究姜黃素(curcumin)對人肺腺癌細胞的作用，揭示了該化合物對肺腺癌細胞的抑制作用和作用機理，為后續(xù)的臨床應用轉(zhuǎn)化研究打下了基礎。
　　肺癌是一種惡性程度很高的腫瘤，在全球范圍內(nèi)都存在很高的發(fā)病率和死亡率，嚴重威脅著人們的生命健康。在我國，因罹患肺癌而產(chǎn)生的死亡率也是位居所有惡性腫瘤的首位，也是目前腫瘤研究者研究的重點和難點。然而對于肺癌的治療，近些年的療效并沒有明顯的改善，患者的5年生存期仍然很低，患者的預后還是

2、很差，生活質(zhì)量很低。為此，臨床醫(yī)生和基礎科研工作者都致力于尋找更為有效的藥物。
　　通常，肺癌可以分為非小細胞肺癌和小細胞癌，而其中以非小細胞肺癌為主，占肺癌總?cè)藬?shù)的80％。而非小細胞肺癌又可以分為大細胞肺癌、腺癌和鱗癌，其中腺癌又占據(jù)絕大多數(shù)的非小細胞肺癌的比例，因此在研究非小細胞肺癌臨床診斷治療方針的時候，多選擇以肺腺癌為研究對象。
　　姜黃素(curcumin)，是一種天然的酚類物質(zhì)，其具有強還原性。目前市面上的姜黃素

3、主要來源是從一些植物的內(nèi)部提取出來，通過化學純化得到純品的姜黃素。姜科、天南星科這樣的一些植物都存在姜黃素的有效成分，獲取也較為容易，人們通常就是通過提取這些植物的根莖來獲取姜黃素。目前的醫(yī)學研究表明，中藥姜黃素在臨床治療上具有十分重要的功能，其中不乏降血脂、抗腫瘤等一系列特殊的作用。根據(jù)目前數(shù)據(jù)庫收攬的文獻查閱可知，姜黃素已經(jīng)被報道可抑制腫瘤細胞的增殖，同時姜黃素也能夠誘導腫瘤細胞發(fā)生明顯的細胞凋亡，其潛在的臨床應用價值可見一斑，但是

4、這些文獻報道都只是停留在粗淺的細胞表型上，并沒有對細胞增殖信號通路以及細胞凋亡的經(jīng)典途徑進行更深層次的剖析和解釋，因此對臨床上更進一步的應用姜黃素帶來了一定的困擾，其作用與腫瘤細胞的具體機制究竟是什么？目前尚無明確的報道。為此，希望研究姜黃素對于人肺腺癌細胞的生物學作用已經(jīng)藥物毒理性，深入了解姜黃素是否具有潛在的臨床應用價值。
　　首先，利用檢測細胞活性的方法，即MTS實驗，發(fā)現(xiàn)姜黃素能夠抑制對人肺腺癌細胞A549和SPC-A-1

5、增殖，而且這種抑制作用呈現(xiàn)明顯的姜黃素毒性劑量-作用時間依賴關系。另外一方面，為了研究姜黃素對于人肺腺癌細胞是否具有誘導凋亡的功能，于是采用了較為普遍的流式凋亡細胞檢測技術，即AnnexinⅤ-FITC/7-AAD雙染檢測凋亡細胞率。
　　結果顯示，姜黃素刺激A549和SPC-A-1細胞之后，兩株細胞均表現(xiàn)出了明顯的凋亡，而且這種細胞凋亡呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴性。即高濃度的姜黃素會產(chǎn)生更多的細胞凋亡。接著，為了深入研究姜黃素誘導肺腺

6、癌細胞凋亡的具體分子機制，關注了PI3K/Akt信號通路下游分子的變化，利用western blot檢測了與細胞凋亡密切相關線粒體凋亡信號通路中的caspase信號蛋白，姜黃素5和10μM組作用A549和SPC-A-1細胞48h后，而CYP1A2、Caspase-9、Caspase-3、PARP蛋白表達量均降低，而觸發(fā)凋亡的cleaved-Caspase-9、cleaved-Caspase-3、cleaved-PARP及Cytochro

7、me C蛋白表達量均增加，這一系列的結果提示姜黃素誘導A549和SPC-A-1細胞凋亡的機制是通過線粒體凋亡信號通路實現(xiàn)的。
　　總的來說，本文的研究表明了中藥姜黃素對于人肺腺癌細胞具有一定的殺傷能力。其不僅能夠抑制肺腺癌細胞的增殖，而且還能夠誘導明顯的細胞凋亡。更深層次的，筆者發(fā)現(xiàn)了姜黃素誘導細胞凋亡的具體機制是通過抑制磷酸化Akt，激活下游線粒體凋亡信號通路來實現(xiàn)的。
　　本研究展示了姜黃素對于肺腺癌細胞的作用，同時在P