植物組織培養(yǎng)最全版

1、植物組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)植物組織培養(yǎng)復(fù)習(xí)一緒論1、植物組織培養(yǎng)的概念答：廣義上是指無菌條件下，在特定的培養(yǎng)基上對(duì)離體的植物器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體甚至包括完整植株進(jìn)行培養(yǎng)的技術(shù)。狹義指對(duì)植物體組織或由植物器官培養(yǎng)產(chǎn)生的愈傷組織進(jìn)行培養(yǎng)直至生成完整植株。2、應(yīng)用和意義答：（1）優(yōu)質(zhì)種苗的快速無性繁殖：無性繁殖作物及不易繁殖作物的快速繁殖通過莖尖培養(yǎng)生產(chǎn)脫毒健康種苗：如草莓、香蕉、甘蔗、馬鈴薯、大蒜等。（2）用于植物遺傳育種種質(zhì)資源離體保存；花粉

2、花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體；胚乳培養(yǎng)產(chǎn)生三倍體；胚培養(yǎng)拯救雜種胚克服遠(yuǎn)緣雜交障礙；原生質(zhì)體培養(yǎng)進(jìn)行體細(xì)胞雜交；植物體細(xì)胞無性系變異誘導(dǎo)和篩選；用于植物基因轉(zhuǎn)移操作等。（3）大規(guī)模植物細(xì)胞、組織和器官培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝物質(zhì)；（4）用于植物生長(zhǎng)發(fā)育理論研究，包括生理學(xué)、病理學(xué)、胚胎學(xué)和細(xì)胞與分子生物學(xué)等。第1章實(shí)驗(yàn)室及基本操作1外植體滅菌過程答：a、予處理：在準(zhǔn)備室將材料放在自來水下沖洗20min。b、在無菌室把植物材料放進(jìn)75％的酒精中浸泡約30s

3、后倒掉。c、用0.1%升汞消毒510min，然后倒掉升汞。d、然后用無菌水沖洗45次。e、取出材料放在無菌紙上。f、將材料剪成需要大小接到培養(yǎng)基上。2.培養(yǎng)基的配置過程（1）量取母液：營養(yǎng)元素和激素。（2）稱量蔗糖、瓊脂，放入600ml左右蒸餾水的鍋內(nèi)，電路上加熱，使瓊脂溶化。（3）加入母液，混合均勻，調(diào)整pH值。（4）分裝入瓶，每瓶40－50ml。（5）封口：用4－6層稱量紙封口，之后滅菌備用。3超凈工作臺(tái)無菌操作技術(shù)（1）在接種前3

4、d用甲醛與高錳酸鉀混合薰蒸接種室，并打開紫外燈照射30min；（2）正式接種前半小時(shí)左右，打開超凈工作臺(tái)上的紫外燈和風(fēng)機(jī)，20～30min后接種；（3）用肥皂水洗凈雙手，在緩沖間內(nèi)穿好滅過菌的實(shí)驗(yàn)服、帽子與拖鞋，進(jìn)入接種室；（4）用75％的酒精擦拭工作臺(tái)面和雙手；（5）用蘸有75％酒精的紗布擦拭裝有培養(yǎng)基的培養(yǎng)器皿，放進(jìn)工作臺(tái)；（6）把解剖刀、剪刀、鑷子等器械浸泡在95％酒精中，在火焰上滅菌后，放在器械架上待用；（7）植物材料表面用消毒

5、劑消毒條件下，具有發(fā)育成完整植株的潛在能力。3再分化：由脫分化形成的愈傷組織重新分化出特定細(xì)胞、組織和器官的過程。4脫分化也稱去分化:指離體條件下生長(zhǎng)的細(xì)胞、組織或器官逐漸失去原來的結(jié)構(gòu)和功能而恢復(fù)分生能力，形成無組織結(jié)構(gòu)的細(xì)胞團(tuán)或愈傷組織的過程。5愈傷組織：在離體培養(yǎng)過程中形成的具有分生能力的一團(tuán)不規(guī)則細(xì)胞，多在外植體切面上產(chǎn)生。6影響植物離體形態(tài)發(fā)生的因素（1）植物種類和基因型a、植物種類不同難易程度不同；被子植物比裸子植物容易。b

6、、同一物種不同基因型間存在較大差別。（2）培養(yǎng)材料的生理狀態(tài)a、發(fā)育年齡：一般幼態(tài)比老態(tài)組織形態(tài)發(fā)生能力高；b、培養(yǎng)器官或組織類型：細(xì)胞分裂旺盛的器官較好；c、培養(yǎng)時(shí)間和細(xì)胞倍性：一般取處于旺盛生長(zhǎng)期的愈傷來誘導(dǎo)器官形成。（3）培養(yǎng)基a營養(yǎng)成分一般認(rèn)為，培養(yǎng)基中的銨態(tài)氮和K有利于胚狀體形成，提高無機(jī)磷的含量可促進(jìn)器官發(fā)生。莖尖培養(yǎng)的起始培養(yǎng)基和芽增殖的培養(yǎng)基往往是不同。碳水化合物種類及濃度對(duì)胚狀體發(fā)育有重要作用。缺糖或低糖無法形成胚狀體

7、。b培養(yǎng)基的性質(zhì)愈傷組織誘導(dǎo)：在固體培養(yǎng)基上（胡蘿卜、石刁柏）。細(xì)胞和胚狀體的誘導(dǎo)：在液體培養(yǎng)基上。誘導(dǎo)胚狀體或早期胚狀體培養(yǎng)：滲透壓，要求高.（4）植物激素及生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑a生長(zhǎng)素：促進(jìn)外植體生長(zhǎng)、生根，并與細(xì)胞分裂素共同誘導(dǎo)不定芽分化及側(cè)芽萌發(fā)與生長(zhǎng)。2，4–D誘導(dǎo)體細(xì)胞胚胎發(fā)生。b細(xì)胞分裂素：促進(jìn)分化和芽形成，抑制根發(fā)育及衰老。c赤霉素：GA3促進(jìn)莖的伸長(zhǎng)，打破休眠，對(duì)芽的誘導(dǎo)和形成有促進(jìn)作用。d乙烯：對(duì)芽的誘導(dǎo)和形成有促進(jìn)或抑制作用

8、e脫落酸：對(duì)體胚的發(fā)生及成熟很重要，可增加胚性愈傷組織的形成和體胚發(fā)生。(5)培養(yǎng)條件a、光照培養(yǎng)條件下，光照的作用是影響細(xì)胞的狀態(tài)，而不是光合作用。連續(xù)光照有利于培養(yǎng)細(xì)胞維管組織的形成。晝夜光照有利于極性的建立及形態(tài)發(fā)生。光強(qiáng)一般要求10005000lx。植物間有所差別。光照周期為10－16h日。不同波長(zhǎng)光質(zhì)作用不同，藍(lán)光有利于芽的分化，紅光有利于根系發(fā)生。b、溫度：大多數(shù)培養(yǎng)溫度為252℃.花藥培養(yǎng)低溫或高溫預(yù)備處理。d、氣體：氧氣

9、、二氧化碳以及乙烯等氣體的濃度和通氣狀況。第3章植物器官和組織培養(yǎng)1器官培養(yǎng)的概念答：指植物某一器官的全部或部分或器官原基的離體培養(yǎng)，包括根、莖、葉、花、果實(shí)、種子等2莖段培養(yǎng)的目的和優(yōu)點(diǎn)答：莖段培養(yǎng)的目的主要是植物的離體快速繁殖，其次是研究莖細(xì)胞的分裂潛力和全能性以及誘導(dǎo)細(xì)胞變異和突變體的獲得。莖段培養(yǎng)是以芽生芽的方式進(jìn)行培養(yǎng)，具有容易成功，變異小，性狀均一，繁殖速度快等優(yōu)點(diǎn)第6章植物細(xì)胞培養(yǎng)1看護(hù)培養(yǎng)：指用一塊活躍生長(zhǎng)的愈傷組織來看