植物組織培養(yǎng)最全版

1、植物組織培養(yǎng)復習植物組織培養(yǎng)復習一緒論1、植物組織培養(yǎng)的概念答：廣義上是指無菌條件下，在特定的培養(yǎng)基上對離體的植物器官、組織、細胞和原生質體甚至包括完整植株進行培養(yǎng)的技術。狹義指對植物體組織或由植物器官培養(yǎng)產(chǎn)生的愈傷組織進行培養(yǎng)直至生成完整植株。2、應用和意義答：（1）優(yōu)質種苗的快速無性繁殖：無性繁殖作物及不易繁殖作物的快速繁殖通過莖尖培養(yǎng)生產(chǎn)脫毒健康種苗：如草莓、香蕉、甘蔗、馬鈴薯、大蒜等。（2）用于植物遺傳育種種質資源離體保存；花粉

2、花藥培養(yǎng)產(chǎn)生單倍體；胚乳培養(yǎng)產(chǎn)生三倍體；胚培養(yǎng)拯救雜種胚克服遠緣雜交障礙；原生質體培養(yǎng)進行體細胞雜交；植物體細胞無性系變異誘導和篩選；用于植物基因轉移操作等。（3）大規(guī)模植物細胞、組織和器官培養(yǎng)生產(chǎn)次生代謝物質；（4）用于植物生長發(fā)育理論研究，包括生理學、病理學、胚胎學和細胞與分子生物學等。第1章實驗室及基本操作1外植體滅菌過程答：a、予處理：在準備室將材料放在自來水下沖洗20min。b、在無菌室把植物材料放進75％的酒精中浸泡約30s

3、后倒掉。c、用0.1%升汞消毒510min，然后倒掉升汞。d、然后用無菌水沖洗45次。e、取出材料放在無菌紙上。f、將材料剪成需要大小接到培養(yǎng)基上。2.培養(yǎng)基的配置過程（1）量取母液：營養(yǎng)元素和激素。（2）稱量蔗糖、瓊脂，放入600ml左右蒸餾水的鍋內(nèi)，電路上加熱，使瓊脂溶化。（3）加入母液，混合均勻，調整pH值。（4）分裝入瓶，每瓶40－50ml。（5）封口：用4－6層稱量紙封口，之后滅菌備用。3超凈工作臺無菌操作技術（1）在接種前3

4、d用甲醛與高錳酸鉀混合薰蒸接種室，并打開紫外燈照射30min；（2）正式接種前半小時左右，打開超凈工作臺上的紫外燈和風機，20～30min后接種；（3）用肥皂水洗凈雙手，在緩沖間內(nèi)穿好滅過菌的實驗服、帽子與拖鞋，進入接種室；（4）用75％的酒精擦拭工作臺面和雙手；（5）用蘸有75％酒精的紗布擦拭裝有培養(yǎng)基的培養(yǎng)器皿，放進工作臺；（6）把解剖刀、剪刀、鑷子等器械浸泡在95％酒精中，在火焰上滅菌后，放在器械架上待用；（7）植物材料表面用消毒

5、劑消毒條件下，具有發(fā)育成完整植株的潛在能力。3再分化：由脫分化形成的愈傷組織重新分化出特定細胞、組織和器官的過程。4脫分化也稱去分化:指離體條件下生長的細胞、組織或器官逐漸失去原來的結構和功能而恢復分生能力，形成無組織結構的細胞團或愈傷組織的過程。5愈傷組織：在離體培養(yǎng)過程中形成的具有分生能力的一團不規(guī)則細胞，多在外植體切面上產(chǎn)生。6影響植物離體形態(tài)發(fā)生的因素（1）植物種類和基因型a、植物種類不同難易程度不同；被子植物比裸子植物容易。b

6、、同一物種不同基因型間存在較大差別。（2）培養(yǎng)材料的生理狀態(tài)a、發(fā)育年齡：一般幼態(tài)比老態(tài)組織形態(tài)發(fā)生能力高；b、培養(yǎng)器官或組織類型：細胞分裂旺盛的器官較好；c、培養(yǎng)時間和細胞倍性：一般取處于旺盛生長期的愈傷來誘導器官形成。（3）培養(yǎng)基a營養(yǎng)成分一般認為，培養(yǎng)基中的銨態(tài)氮和K有利于胚狀體形成，提高無機磷的含量可促進器官發(fā)生。莖尖培養(yǎng)的起始培養(yǎng)基和芽增殖的培養(yǎng)基往往是不同。碳水化合物種類及濃度對胚狀體發(fā)育有重要作用。缺糖或低糖無法形成胚狀體

7、。b培養(yǎng)基的性質愈傷組織誘導：在固體培養(yǎng)基上（胡蘿卜、石刁柏）。細胞和胚狀體的誘導：在液體培養(yǎng)基上。誘導胚狀體或早期胚狀體培養(yǎng)：滲透壓，要求高.（4）植物激素及生長調節(jié)劑a生長素：促進外植體生長、生根，并與細胞分裂素共同誘導不定芽分化及側芽萌發(fā)與生長。2，4–D誘導體細胞胚胎發(fā)生。b細胞分裂素：促進分化和芽形成，抑制根發(fā)育及衰老。c赤霉素：GA3促進莖的伸長，打破休眠，對芽的誘導和形成有促進作用。d乙烯：對芽的誘導和形成有促進或抑制作用

8、e脫落酸：對體胚的發(fā)生及成熟很重要，可增加胚性愈傷組織的形成和體胚發(fā)生。(5)培養(yǎng)條件a、光照培養(yǎng)條件下，光照的作用是影響細胞的狀態(tài)，而不是光合作用。連續(xù)光照有利于培養(yǎng)細胞維管組織的形成。晝夜光照有利于極性的建立及形態(tài)發(fā)生。光強一般要求10005000lx。植物間有所差別。光照周期為10－16h日。不同波長光質作用不同，藍光有利于芽的分化，紅光有利于根系發(fā)生。b、溫度：大多數(shù)培養(yǎng)溫度為252℃.花藥培養(yǎng)低溫或高溫預備處理。d、氣體：氧氣

9、、二氧化碳以及乙烯等氣體的濃度和通氣狀況。第3章植物器官和組織培養(yǎng)1器官培養(yǎng)的概念答：指植物某一器官的全部或部分或器官原基的離體培養(yǎng)，包括根、莖、葉、花、果實、種子等2莖段培養(yǎng)的目的和優(yōu)點答：莖段培養(yǎng)的目的主要是植物的離體快速繁殖，其次是研究莖細胞的分裂潛力和全能性以及誘導細胞變異和突變體的獲得。莖段培養(yǎng)是以芽生芽的方式進行培養(yǎng)，具有容易成功，變異小，性狀均一，繁殖速度快等優(yōu)點第6章植物細胞培養(yǎng)1看護培養(yǎng)：指用一塊活躍生長的愈傷組織來看