家蠶整合蛋白β基因的克隆及其表達分析.pdf

1、整合蛋白（integrin）是一種細胞表面的跨膜異二聚體蛋白，由α和β亞基組成，在哺乳動物體內可以調節(jié)細胞粘著、增殖、存活和凋亡、變形、細胞間接觸、基因表達、細胞分化等。昆蟲體內的整合蛋白在昆蟲血細胞對外物的包囊過程中起著重要的作用。 在哺乳動物中整合蛋白是一個較大的基因家族，如人體內目前共發(fā)現(xiàn)了18個α亞基和8個β亞基。而在昆蟲中鑒定到的整合蛋白要少一些，特別是β亞基，目前一種昆蟲最多的也只鑒定了兩個（果蠅、岡比亞按蚊）。本項

2、研究選擇鱗翅目模式昆蟲-家蠶（Bombyx mori）為研究對象，從其基因組中鑒定整合蛋白β亞基，并對這些基因的功能進行了初步研究。結果如下： 1.家蠶整合蛋白β亞基的鑒定：利用生物信息學的方法，從家蠶基因組中鑒定了兩個整合蛋白β亞基，并用RT-PCR法克隆了這兩個β亞基cDNA的全長序列。β1亞基總長度為2670bp，編碼一個由833個氨基酸殘基組成的蛋白質。β2亞基總長度為2314bp，編碼一個由747個氨基酸殘基組成的蛋白

3、質。家蠶整合蛋白β1和β2亞基基因與其他昆蟲整合蛋白β亞基相似，有I-like結構域和NPxY模體以及四個半胱氨酸重復序列。 2.構建了整合蛋白β亞基的進化樹。結果表明，昆蟲整合蛋白β亞基共分為兩大簇。與果蠅和岡比亞按蚊一樣，家蠶的兩個β亞基也各歸入這兩簇內。此外，鑒于果蠅、岡比亞按蚊和家蠶這三種昆蟲中均只發(fā)現(xiàn)了兩個β亞基，我們推測昆蟲體內整合蛋白β亞基的數(shù)量較少。 3.家蠶整合蛋白β亞基組織特異性表達分析：通過半定量R

4、T-PCR檢測家蠶整合蛋白β1和β2亞基在其5齡幼蟲表皮、脂肪體、頭、絲腺、中腸、馬氏管、血淋巴中的表達情況。結果表明，β1亞基除不在絲腺和中腸表達外，在表皮、脂肪體、頭、馬氏管、血淋巴中均有表達，且表皮表達量最少，頭部表達量最多，而在其他組織中表達量基本相同。β2亞基在表皮、頭、血淋巴中都有表達，在頭部表達量相對較少。 4.注射凝膠珠對家蠶整合蛋白β1和β2亞基表達量的影響：利用熒光定量PCR法檢測了注射凝膠珠后家蠶整合蛋白β