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文檔簡介
1、牛結(jié)核病(Bovine tuberculosis)主要是由牛分枝桿菌(Mycobacterium hovis)引起的一種人獸共患的慢性消耗性傳染病，該病的流行與傳播不僅嚴(yán)重地影響著畜牧業(yè)的持續(xù)發(fā)展，而且也嚴(yán)重地威脅和危害著人類的生命與健康。
結(jié)核分枝桿菌是細(xì)胞內(nèi)寄生菌，機體抵抗結(jié)核分枝桿菌的感染主要依靠細(xì)胞免疫。研究發(fā)現(xiàn)，結(jié)核分枝桿菌培養(yǎng)濾液中存在的大量分泌蛋白能有效地誘發(fā)宿主對結(jié)核分枝桿菌的抵抗性，產(chǎn)生免疫保護(hù)作用，因此
2、分泌蛋白是保護(hù)性抗原。
本研究以牛分枝桿菌染色體DNA 為模板，分別以MPB64、MPB70、CFP10、ESAT6 蛋白基因特異性引物進(jìn)行PCR 擴增，并采用重疊延伸剪接技術(shù)(splice byoverlapping extension，SOE)獲得融合基因CFP10-ESAT6。將這些目的基因克隆入表達(dá)載體，構(gòu)建出原核表達(dá)載體pQE30-64、pQE30-70，pQE30-10-6。將質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至E. Coli DH5α
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