牙鲆和石鰈血液指標測定、血細胞形態(tài)觀察及核型分析.pdf

1、本試驗以牙鲆和石鰈為研究對象，應用常規(guī)的血液學指標測定方法和血細胞涂片法，測定二者的血液學指標，并觀察其血細胞形態(tài);采用外周血細胞培養(yǎng)法制備染色體標本，經Giemsa染色、鏡檢、拍照后進行核型分析。研究結果如下:
　　 1.牙鲆的紅細胞密度為(2.44±0.14)×106個/mm3;白細胞密度為(3.28±0.45)×104個/mm3;血紅蛋白含量為(6.27±0.42)g/100mL;紅細胞滲透脆性為(0.45±0.01)g％

2、;沉降率為(5.73±0.25)mm/h。石鰈的紅細胞密度為(2.84±0.26)×106個/mm3;白細胞密度為(5.30±0.14)×105個/mm3;血紅蛋白含量為(6.44±0.15)g/100mL;紅細胞滲透脆性為（0.45±0.05）g％;沉降率為(4.57±0.07)mm/h。
　　 2.采用外周血液進行涂片觀察，在涂片上可區(qū)分出牙鲆和石鰈的紅細胞和5種白細胞，他們分別是淋巴細胞、血栓細胞、單核細胞、嗜中性粒細胞、

3、嗜酸性粒細胞，未見嗜堿性粒細胞。其中淋巴細胞的體積最小，單核細胞的體積最大;在白細胞中，淋巴細胞數量最多，其次是血栓細胞，嗜酸性粒細胞的數量最少;此外還可見正在分裂的紅細胞，說明紅細胞可在外周血中直接分裂。
　　 3.采用外周血細胞培養(yǎng)法制備染色體標本，用RPMI1640全血培養(yǎng)基進行培養(yǎng)，從血液保存時間、刺激源PHA（植物血球凝集素）和ConA（刀豆蛋白A）等方面對外周血細胞的培養(yǎng)及其染色體制備條件進行探討，建立較成熟的外周血

4、淋巴細胞培養(yǎng)及染色體制備的方法。結果表明:血液在4℃保存3d后細胞仍可正常生長，ConA和PHA兩種刺激源均能促進外周血細胞的分裂增殖，從血細胞形態(tài)和白細胞數目來看，以ConA為刺激源的作用效果好于以PHA為刺激源的作用效果，培養(yǎng)時間以72h最好。牙鲆血細胞在21℃，以終濃度為0.1mg/mL的ConA為刺激源培養(yǎng)72h，在結束培養(yǎng)前4h加入終濃度1.5μg/mL秋水仙素，低滲35min可獲得較好的染色體分裂相。石鰈血細胞在16℃，以終