

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領
文檔簡介
1、棉花種植廣泛,是關系國計民生的重要物資,在國民經(jīng)濟發(fā)展中具有重要地位。由于生長素在植物生長發(fā)育和生理反應的過程中起著重要的調(diào)控作用,生長素可以調(diào)控細胞的伸長、分裂和分化,以及植物的頂端優(yōu)勢、不定根的形成、植物的向性反應、果實的發(fā)育、和胚的形成等方面。因此,研究棉花生長素信號轉(zhuǎn)導過程以及轉(zhuǎn)導途徑中的重要元件具有重要意義,同時研究棉花生長素信號轉(zhuǎn)導相關的基因的生物學功能,對全面了解生長素在棉花的生長發(fā)育以及形態(tài)建成過程中所發(fā)揮的作用,以及闡
2、明棉花中生長素信號轉(zhuǎn)導的復雜分子機制具有重要的理論意義。已有的研究成果表明,生長素調(diào)控的過程更多是通過調(diào)控其它基因表達來影響植物的發(fā)育和其他的一些反應,這些被調(diào)控的基因稱為生長素誘導的原初表達基因,能夠被生長素誘導繼而快速、特異、并且在不需要新的蛋白質(zhì)生物合成的條件下表達。原初反應基因包括Aux/IAAs( auxin/indoleacetis acids proteins)、SAURs(small auxin-up RNA)和GH3等
3、三類主要的轉(zhuǎn)錄因子家族。
本研究利用cDNA芯片技術在棉纖維發(fā)育開花后5天(5DPA)、10天(10DPA)、15天(15DPA)、20天(20DPA)、25天(25DPA)篩選陸地棉標準系TM-1和優(yōu)質(zhì)抗病品種海島棉7124的差異表達基因,克隆得到與棉花生長素信號轉(zhuǎn)導途徑相關的3個重要cDNA克隆,并通過Real-Time PCR( Q-PCR)驗證了基因表達:
(1)生長素結(jié)合蛋白ABP(auxin-bi
4、nding protein, GhABP)(GenB ank登錄號:AAO92740)該cDNA克隆插入片段長度為897bp,開放讀碼框長度為618bp,編碼206個氨基酸;(2)兩個生長素原初反應基因(primary auxin responsive genes),一個屬于其中的生長素/吲哚乙酸蛋白( auxin/indoleacetis acids proteins, Aux/IAAs)超家族成員,該cDNA克隆插入片段長度為101
5、4bp,開放讀碼框長度為726bp,編碼242個氨基酸,Blastx比對與擬南芥(Arabidopsis thaliana)、蓖麻(Ricinus communis)、番薯(Ipomoeanil)等物種的IAA16都有一定相似度,因此將其命名為GhIAA16a;另一個屬于生長素原初反應基因其中的SAURs( small auxin-up RNAs)轉(zhuǎn)錄因子家族,該cDNA克隆插入片段長度為794bp,開放讀碼框長度為366bp,編碼12
6、2個氨基酸,Blastx比對與擬南芥(Arabidopsis thaliana)、玉米(Zea mays)等物種的SAUR基因具有一定的相似性,因此將該基因命名為GhSAUR2。
采用SignalP程序?qū)@三個基因進行了N端信號肽預測,GhSAUR2、GhIAA16a均無信號肽結(jié)構(gòu),只有GhABP具有典型的信號肽,說明只有GhABP為分泌蛋白。并且對這三個基因進行了保守區(qū)域分析等。
采用實時熒光定量PCR方法
7、(Real-time quantitative PCR)驗證各基因的表達,結(jié)果與芯片基本一致。其中GhABP與GhIAA16a表達趨勢相反,在棉纖維細胞伸長期(開花后10天)GhABP高量表達,而GhIAA16a表達量達最低,10天以后到25天GhABP表達量逐漸下降而GhIAA16a逐漸上升。說明GhABP基因可能是促進棉纖維發(fā)育,而GhIAA16a則和抑制棉纖維發(fā)育有關。
利用本實驗室陸地棉遺傳標準系TM-1和海島棉7
8、124培育的140個BC1作圖群體分別對這三個基因進行染色體定位,GhABP、GhIAA16a定位到11號染色體,GhSAUR2定位到第8號染色體。
對GhABP、GhIAA16a、與GhSAUR2基因分別構(gòu)建了GFP載體,然后利用基因槍法轟擊洋蔥表皮,亞細胞定位結(jié)果顯示GhABP定位于細胞膜上,GhIAA16a基因定位于細胞核上。
對GhABP、GhIAA16a與GhSAUR2基因分別構(gòu)建了pBI121-3
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 棉花中三個激素相關基因的克隆與鑒定.pdf
- 毛白楊生長素信號轉(zhuǎn)導因子基因的分離與功能的初步分析.pdf
- 棉花生長素結(jié)合蛋白(GhABP1)中三個保守半胱氨酸的功能研究.pdf
- 生長素釋放肽對CLP小鼠介導ALI的保護作用與相關信號轉(zhuǎn)導機制.pdf
- 三個棉花纖維發(fā)育相關基因的克隆與功能分析.pdf
- 三個茶樹防衛(wèi)相關基因的克隆及鑒定.pdf
- 棉花生長素結(jié)合蛋白基因表達載體的構(gòu)建及其遺傳轉(zhuǎn)化研究.pdf
- 枇杷種質(zhì)限制生長保存及乙烯代謝與信號轉(zhuǎn)導相關基因等克隆及表達.pdf
- 黃瓜乙烯信號轉(zhuǎn)導途徑相關基因的克隆分析及黃瓜遺傳轉(zhuǎn)化體系研究.pdf
- 桑樹茉莉酸生物合成與信號轉(zhuǎn)導途徑基因的鑒定和功能研究.pdf
- 桃果實幾個乙烯信號轉(zhuǎn)導相關基因的克隆及其表達.pdf
- 玉米大斑病菌信號轉(zhuǎn)導途徑中ras基因的克隆與功能研究.pdf
- 三個與水稻株型相關突變體的鑒定與基因克隆.pdf
- 棉花三個SAUR基因的克隆及其功能分析.pdf
- 作物缺磷和菌根信號轉(zhuǎn)導途徑中調(diào)控基因的鑒定與功能驗證.pdf
- 葡萄水楊酸和茉莉酸信號轉(zhuǎn)導途徑中4個重要基因的克隆及表達分析.pdf
- 毛竹生長素相關基因的克隆及輻射對其表達的影響.pdf
- 釀酒酵母三個耐鹽相關基因克隆及其在棉花中轉(zhuǎn)化.pdf
- 槲皮素調(diào)節(jié)谷胱甘肽代謝的信號轉(zhuǎn)導途徑研究.pdf
- 生長素響應因子GhARF6對棉花生長發(fā)育的影響.pdf
評論
0/150
提交評論