對(duì)蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)極早期基因啟動(dòng)子的研究.pdf

1、對(duì)蝦白斑綜合癥病毒(WSSV)是困擾對(duì)蝦養(yǎng)殖業(yè)最主要的病原體，目前人們對(duì)它的侵染機(jī)制還不完全的了解。與其他DNA病毒相似，WSSV的基因轉(zhuǎn)錄通常具有時(shí)相性的特征，根據(jù)轉(zhuǎn)錄時(shí)間的不同可以細(xì)分為極早期基因、早期基因、晚期基因。本研究選出其中三個(gè)極早期基因wsv051，wsv056，wsv083進(jìn)行研究，5’RACE實(shí)驗(yàn)具體找到這三個(gè)極早期基因的起始轉(zhuǎn)錄位點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)wsv051的起始轉(zhuǎn)錄位點(diǎn)位于ATG上游366nt處，wsv056的起始轉(zhuǎn)錄位點(diǎn)

2、位于ATG上游227nt處，wsv083的起始轉(zhuǎn)錄位點(diǎn)位于ATG上游113nt處。wsv051，wsv083的起始轉(zhuǎn)錄位點(diǎn)位于預(yù)測(cè)的。TATA box下游23nt處，wsv056可能不受TATA box調(diào)控影響。將這三個(gè)極早期基因的ATG上游約600bp的啟動(dòng)子序列單獨(dú)克隆至缺少啟動(dòng)子序列的pIZ△IE/EGFP質(zhì)粒中，使得GFP報(bào)告基因的轉(zhuǎn)錄在WSSV極早期基因啟動(dòng)子的調(diào)控之下，并轉(zhuǎn)染至昆蟲細(xì)胞High Five細(xì)胞系中。再通過一系列