雞褪黑激素受體基因的多態(tài)性及其在不同組織中表達(dá)量的研究.pdf

1、褪黑激素（Melatonin，MEL）是松果體和視網(wǎng)膜分泌的一種重要內(nèi)分泌激素，它在多個(gè)物種的多個(gè)組織中廣泛存在，是光照信息同生殖系統(tǒng)協(xié)調(diào)關(guān)系中的重要信號(hào)，光照對(duì)繁殖機(jī)能的調(diào)節(jié)依靠褪黑激素介導(dǎo)，與褪黑激素受體（Melatonin receptor，MTNR）結(jié)合來(lái)調(diào)節(jié)動(dòng)物的晝夜節(jié)律和繁殖變化。本研究旨在從分子水平上了解雞MTNR基因的遺傳變異以及開產(chǎn)前后不同組織的表達(dá)差異，以便為地方雞種的遺傳改良提供依據(jù)。研究結(jié)果如下：
　　

2、本研究以文昌雞為研究對(duì)象，設(shè)計(jì)了多對(duì)引物，運(yùn)用克隆測(cè)序及直接測(cè)序方法，分別擴(kuò)增MTNR1A、MTNR1B和MTNR1C三個(gè)受體基因的5′UTR和外顯子區(qū)域，并與文昌雞的產(chǎn)蛋性狀做關(guān)聯(lián)分析。結(jié)果表明：MTNR1B受體基因的5′UTR存在14個(gè)SNPs以及1個(gè)插入缺失位點(diǎn)。其中-778位點(diǎn)突變基因(A→G)對(duì)文昌雞中期(22-31周齡)產(chǎn)蛋數(shù)和46周齡總產(chǎn)蛋數(shù)的顯性效應(yīng)分別為達(dá)到了2.3枚和6.2枚。對(duì)后期(32-46周齡)產(chǎn)蛋數(shù)和46周齡

3、總產(chǎn)蛋數(shù)而言，-216位點(diǎn)C對(duì)A為優(yōu)勢(shì)等位基因，加性效應(yīng)值分別為2.5枚和3.2枚；顯性效應(yīng)分別為3.5枚和6.8枚，且表現(xiàn)為超顯性。兩個(gè)位點(diǎn)的單倍型分析表明，AA單倍型對(duì)46周齡的總產(chǎn)蛋數(shù)效應(yīng)值在4種單倍型中最低；AA/AA合并基因型母雞的開產(chǎn)日齡顯著晚于AC/AA和GC/GC基因型個(gè)體(P＜0.05)。MTNR1A、MTNR1B受體基因的外顯子高度保守，而在MTNR1C受體基因exon3上存在C378T和G381A兩個(gè)SNPs位點(diǎn)，

4、但是這兩個(gè)位點(diǎn)并沒(méi)有導(dǎo)致氨基酸的改變。以β-actin基因?yàn)閮?nèi)標(biāo)，運(yùn)用qRT-PCR方法，比較了MTNR1A、MTNR1B和MTNR1C基因在心臟、肝臟、輸卵管、卵巢、腦和視交叉組織及在雞開產(chǎn)前后表達(dá)量的差別。結(jié)果表明：MTNR1A基因在不同組織開產(chǎn)后均表現(xiàn)為表達(dá)上調(diào)（除腦中表達(dá)下調(diào)外），在開產(chǎn)前后和開產(chǎn)前各組織中的表達(dá)量差異并不顯著，但在開產(chǎn)后各組織中的表達(dá)量差異顯著，且以卵巢表達(dá)量最高。與開產(chǎn)前相比，開產(chǎn)后各組織中MTNR1B和MT