葡萄酚類物質及其生物合成相關結構基因表達.pdf

1、本文以‘左山一’、‘左山二’、‘雙紅’、‘雙優(yōu)’、‘雙豐’5個山葡萄品種和2個山-歐雜種葡萄品種‘左紅一’、‘左優(yōu)紅’果皮和酒為試驗材料,應用HPLC-MS/MS技術,對果實發(fā)育過程中果皮及酒中花色苷和非花色苷酚種類及含量變化規(guī)律進行了研究。同時,以‘雙紅’山葡萄果實為試材,應用HPLC-MS/MS和實時熒光定量PCR技術對果實發(fā)育過程中酚類物質的含量變化及生物合成相關的14個結構基因mRNA轉錄水平進行了定量分析。
　　 研究

2、結果表明,不同品種果皮中花色苷組成不同,在7個品種果實發(fā)育過程中果皮中共檢測到花色苷15種。其中,雙糖苷6種,單糖苷9種,單糖苷中檢測出乙?；咸烟擒?種,香豆?；咸烟擒?種。7個品種轉色前均未檢測到花色苷,隨著果實發(fā)育,花色苷含量不斷增加,到達成熟時含量最高。主成分分析表明,花青素類、二甲花翠素類和甲基花青素類花色苷對果皮中花色苷的組成起決定作用。7個品種酒中共檢測到花色苷15種。其中,雙糖苷6種,單糖苷9種,在果皮及酒中首次檢測到

3、花葵素一3,5-雙葡萄糖苷,在酒中未檢測出乙酰化和香豆?；ㄉ?。主成分分析表明,花青素類、甲基花翠素類和花翠素類花色苷對酒中花色苷組成起決定作用。
　　 7個品種果實發(fā)育過程中果皮中共檢測到18種非花色苷酚。其中,苯甲酸類3種,肉桂酸類4種,黃烷-3-醇類3種,黃酮醇類5種,白藜蘆醇類3種。果皮中非花色苷酚的變化為轉色前含量呈上升趨勢,轉色期至100％著色呈下降趨勢,而后緩慢上升至成熟。主成分分析表明,肉桂酸類、白藜蘆醇類和黃

4、酮醇類對果實發(fā)育過程中果皮中非花色苷酚的組成起決定作用。在7個品種酒中,共檢測到30種非花色苷酚。其中,苯甲酸類5種,肉桂酸類7種,黃烷-3-醇類5種,黃酮醇類9種,白藜蘆醇類4種。主成分分析表明,肉桂酸類、黃烷-3-醇類和苯甲酸類對酒中非花色苷酚組成起決定作用。
　　 ‘雙紅’山葡萄果實的生長曲線表現(xiàn)為雙“S”型。轉色前未檢測到花色苷,轉色后花色苷不斷積累,至成熟含量最高,花翠素類、甲氧基類、單糖苷類花色苷與總花色苷的變化規(guī)律

5、相一致。苯甲酸類花后2-6周未檢測到,花后8周至100％著色含量呈上升趨勢,而后下降至成熟。肉桂酸類、黃烷-3-醇類在果實整個發(fā)育過程中含量呈下降趨勢。轉色前未檢測到白藜蘆醇類物質,轉色期至成熟含量呈上升趨勢。
　　 ‘雙紅’果實發(fā)育過程中,酚類物質生物合成相關結構基因的表達因果實發(fā)育時期而不同。PAL、CHI1、F3H2、DFR、LDOX花后2-4周為上調表達,花后6周至轉色期為下調表達,轉色期至成熟為上調表達,轉色期至成熟花

6、色苷的含量變化與這5個酶基因的轉錄水平呈正相關;CHS3、RS、UFGT、GST、OMT花后2周至轉色期為下調表達,轉色期至成熟為上調表達,轉色期至成熟花色苷的含量變化與CHS3、UFGT、GST的轉錄水平呈正相關,白藜蘆醇類的含量變化與RS的轉錄水平呈正相關,甲氧基類花色苷的含量變化與OMT的轉錄水平呈正相關;F3'H花后2-4周為上調表達,花后6周為下調表達,花后8周至成熟為上調表達,轉色期至成熟花青素類花色苷的含量變化與F3'H的