基因槍和農桿菌介導耐鹽基因EhHOG對小麥品種的遺傳轉化.pdf

1、土壤鹽堿化是影響世界上作物生產的重要環(huán)境脅迫因素，嚴重影響了我國小麥的生產，培育耐鹽的小麥新品種對有效利用鹽堿地，擴大小麥種植面積，提高小麥產量和經(jīng)濟效益具有重要意義。傳統(tǒng)育種方法在改良作物耐鹽堿性上存在諸多困難，使得小耐鹽堿麥育種進展緩慢。而通過轉基因技術將優(yōu)良的外源耐鹽基因導入到小麥品種之中，從而培育出耐鹽的小麥新品種已有可能。源于以色列死海絲狀真菌E.herbariorum的EhHOG為編碼絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)的基因，對

2、鹽有很強的耐性。本研究利用基因槍和農桿菌兩種介導方法將EhHOG耐鹽基因導入到不同的小麥品種中，以期獲得耐鹽性強的小麥種質，主要結果如下:
　　(1)大腸桿菌和農桿菌EhHOG基因載體的獲得:本研究分別對大腸桿菌感受態(tài)菌株E.coli DH5α和農桿菌感受態(tài)菌株AGL1進行了EhHOG基因質粒表達載體的轉化，PCR和雙酶切的驗證結果表明轉化取得了成功;
　　(2)基因槍介導的小麥遺傳轉化:以普通小麥品種華麥2566、華麥21

3、52、鄭麥9023和硬粒小麥品種LDN這4個基因型的小麥品種為受體，采用基因槍法對耐鹽基因EhHOG進行了遺傳轉化，最終獲得24株小麥抗性植株，初步檢測結果表明，其中有3株華2566和14株LDN呈現(xiàn)出EhHOG基因陽性;
　　(3)小麥農桿菌轉化體系的建立和EhHOG基因的遺傳轉化:在查閱相關資料和結合相關實驗的基礎上建立了小麥的農桿菌轉化體系;在此基礎上，以普通小麥品種華麥2668、隴春23、科農199和硬粒小麥品種LDN這4