DHAV-1感染DEF和鴨的細(xì)胞因子IL-2、IL-2-B、IFN-γ基因mRNA表達(dá)水平研究.pdf

1、鴨甲肝病毒A型（Duck Hepatitis A Virus，DHAV-1）屬于小RNA病毒科，禽肝炎病毒屬。DHAV-1主要引起10d以內(nèi)的雛鴨出現(xiàn)以肝損傷為特征的鴨病毒性肝炎病，該病傳播迅速、致死性高，雛鴨一旦感染該病，死亡率高達(dá)90％以上，這給我國(guó)的養(yǎng)鴨業(yè)帶來(lái)巨大的經(jīng)濟(jì)損失。
　　本試驗(yàn)以DHAV-1分別感染原代鴨胚成纖維細(xì)胞(DEF)、4d雛鴨和21d中鴨，于DEF感染DHAV-1后的0h對(duì)照組和6h、12h、24h、48

2、h、72h、96h試驗(yàn)組收取DEF，檢測(cè)DEF中病毒含量和細(xì)胞因子IL-2、IL-12-B、IFN-γ基因mRNA表達(dá)水平。DHAV-1感染DEF后，在24h致細(xì)胞病變，經(jīng)RT-qPCR檢測(cè)病毒RNA增殖情況，DHAV-1在感染DEF后的6h-48h上升，48h到達(dá)高峰，而后下降。并于24h在透射電鏡下觀察到直徑在30nm左右的球形病毒顆粒。上述結(jié)果表明，本試驗(yàn)成功建立DHAV-1細(xì)胞感染模型。DEF感染DHAV-1后，細(xì)胞因子IL-2

3、、IL-12-B、IFN-γ在6h-72h上調(diào)，96h下調(diào)，并存在顯著差異。
　　于DHAV-1感染后0h對(duì)照組與6h、12h、24h、48h、72h、96h實(shí)驗(yàn)組剖殺4d和21d鴨，取肝、脾、胸腺、法氏囊為試驗(yàn)材料，大體解剖和RT-qPCR結(jié)果證明動(dòng)物感染模型復(fù)制成功。試驗(yàn)結(jié)果顯示:4d雛鴨肝中病毒含量高于21d中鴨，均呈先上升后下降的趨勢(shì)。4d雛鴨和21d中鴨脾中病毒含量大致呈先上升后下降的趨勢(shì)，在24h-48h病毒含量最高。

4、胸腺與法氏囊中的病毒含量變化不穩(wěn)定。
　　在4d雛鴨中，細(xì)胞因子IL-2在DHAV-1感染后的肝、胸腺、法氏囊的各時(shí)間點(diǎn)均上調(diào)，在脾中6h-12h上調(diào)，24h-96h下調(diào)。細(xì)胞因子IL-12-B在各個(gè)器官中均為上調(diào)。細(xì)胞因子IFN-γ在各個(gè)器官中的表達(dá)時(shí)有上調(diào)時(shí)有下調(diào)。
　　在21d中鴨中，細(xì)胞因子IL-2在肝、脾、胸腺中主要于24h-48h下調(diào)，其他時(shí)間點(diǎn)上調(diào)，在法氏囊中于72h下調(diào)，其他時(shí)間上調(diào)。細(xì)胞因子IL-12-B在