小麥抗病相關(guān)基因的轉(zhuǎn)化及瞬間表達研究.pdf

1、　　小麥是我國乃至世界的重要糧食作物。小麥真菌病害是影響小麥產(chǎn)量的重要因素。隨著植物分子生物學和功能基因組學的快速發(fā)展，我們對植物復雜的抗病反應過程有了越來越清晰的了解。同時，越來越多的抗病和抗病反應過程相關(guān)基因的克隆也成為可能。對這些基因進行功能鑒定和抗病效果分析，并利用基因工程手段開展小麥抗病分子育種將具有廣闊的前景。結(jié)合傳統(tǒng)的育種方法，對小麥抗病性狀的改良將更為快速和高效。 本實驗首先利用基因槍轉(zhuǎn)化方法，將兩個抗病相關(guān)基因

2、TaTBL和TaTST轉(zhuǎn)入到感病小麥品種楊麥158中，獲得經(jīng)過分子鑒定和抗性分析的轉(zhuǎn)化植株。隨后，又利用瞬間表達技術(shù)對TaTBL、TaPK1、TaTST、G1b3s2、Cht4和G1b3s6等6個抗病相關(guān)基因的功能進行了分析，表明其在感病小麥葉片表皮細胞中的過量表達能顯著抑制白粉菌對細胞的侵入和吸器的形成，提高表達細胞的抗性。 1.1小麥抗病相關(guān)基因的轉(zhuǎn)化　　利用花青素合成酶調(diào)節(jié)基因作為報告基因?qū)τ绊懟驑屴D(zhuǎn)化的多個參數(shù)進行了

3、深入的分析，優(yōu)化了轉(zhuǎn)化過程。轉(zhuǎn)化植株苗期離體葉片的白粉病接種實驗表明，TaTBL和TaTST基因的導入，在一定程度上增強了轉(zhuǎn)化植株對白粉菌的抗性，表現(xiàn)為延緩了白粉菌的發(fā)育。 1.2小麥抗病相關(guān)基因的瞬間表達研究　　采用瞬間表達技術(shù)分析了小麥類Beclin1基因TaTBL、絲氨酸/蘇氨酸激酶基因TaPK1、硫代硫酸硫轉(zhuǎn)移酶基因TaTST、β-1,3-葡聚糖苷酶基因G1b3s2、幾丁質(zhì)酶基因Cht4和β-1，3-葡聚糖苷酶基因G1