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文檔簡介
1、目的:本實驗通過檢測氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)對大鼠心肌細胞中干細胞因子(SCF)表達的影響,從而為明了ox-LDL在心肌梗死后干細胞歸巢并修復心肌梗死過程中的作用提供依據。 方法:用超速離心法從正常人血漿中分離出低密度脂蛋白后,用Cu2+使之氧化成氧化型低密度脂蛋白。從新生大鼠心臟中分離出心肌細胞,于不同時間點(0h,1h,6h,12h,24h)在培養(yǎng)基中分別加入終濃度為25 μg∕ml的氧化低密度脂蛋白和低密度脂蛋白,
2、用RT-PCR檢測心肌細胞中SCF mRNA的表達;用細胞免疫組織化學和Western blotting的方法檢測NF-κB的活性。 結果: (1)RT-PCR結果顯示:與相同濃度的低密度脂蛋白相比,25 μg∕ml的氧化低密度脂蛋白明顯地抑制了大鼠心肌細胞中SCF的表達(與對照組相比,P<0.05),呈時間依賴性。 (2)細胞免疫組化與Western蛋白印跡結果均顯示,與未加任何處理因素的空白對照組相比,LPS
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