益腎膠囊對糖尿病腎病大鼠腎間質(zhì)Wnt與NF-κB影響的研究.pdf

1、目的:
　　 觀察益腎膠囊對糖尿病腎病(DN)大鼠模型腎間質(zhì)Wnt4、磷酸化糖原合成酶激酶-3β(PGSK-3β)及核因子-κB(NF-κCB)表達水平的影響。
　　 方法:
　　 健康雄性Wistar大鼠32只，體重(200±20)g，隨機選取8只作為正常對照組(n=8)，其余24只全部腹腔注射STZ，制備糖尿病腎病動物模型。造模成功，24只大鼠隨機分成3組：模型組(n=8)，益腎膠囊組(n=8)和氯沙坦組(n

2、=8)。連續(xù)給藥12周。給藥12周后，檢測各組大鼠24h尿蛋白定量，腎臟功能指標血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)，解剖大鼠，取左腎分離包膜后行組織固定，石蠟包埋切片，行HE染色、免疫組化。光鏡下觀察腎間質(zhì)病理變化情況，用免疫組化法檢測Wnt、PGSK-3β與NF-κB的表達，取右腎迅速置于-80℃冰箱以備行實時熒光定量(FQ-PCR)法測定腎組織中Wnt、NF-κBmRNA的表達。
　　 結果:
　　 各項指標測定結果

3、：12周末，與正常組比較模型組大鼠24h尿蛋白定量、血Scr、BUN明顯增加，差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05)；與模型組比較益腎膠囊治療組大鼠24h尿蛋白定量、血Scr、BUN均明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）；益腎膠囊治療組大鼠24h尿蛋白定量、血Scr、BUN與氯沙坦治療組比較無明顯差異(P＞0.05)。病理結果：光鏡下，12周末，正常組大鼠腎小管結構未見明顯異常：模型組大鼠部分腎小管明顯擴張，上皮細胞水腫、破碎程度加深，

4、糖原空泡增多、增大，管腔內(nèi)可見破碎脫落的細胞，腎間質(zhì)可見淋巴細胞和單核細胞浸潤；益腎膠囊治療及氯沙坦治療組大鼠腎間質(zhì)病理變化明顯減輕。免疫組化結果：正常組大鼠Wnt在腎小管中有少量表達，PGSK-3β無表達，NF-κB在腎小管上皮細胞胞漿有表達；與正常組比較模型組大鼠腎小管Wnt、PGSK-3β與NF-κB表達明顯上調(diào)，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；與模型組比較益腎膠囊治療組大鼠腎小管Wnt、PGSK-3β與NF-κB表達均明顯下調(diào)

5、，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；益腎膠囊治療組與氯沙坦治療組大鼠腎小管Wnt、PGSK-3β與NF-κB的表達均無明顯差異(P＞0.05)。FQ-PCR結果：與正常組比較模型組大鼠腎組織Wnt、NF-κBmRNA表達明顯上調(diào)，差異有統(tǒng)計學差異（P＜0.05）；與模型組比較益腎膠囊治療組大鼠腎小管Wnt、NF-κBmRNA表達均明顯下調(diào)，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；益腎膠囊治療組與氯沙坦治療組大鼠腎小管Wnt、NF-κBmRNA