羌活和獨(dú)活藥材色譜指紋圖譜研究.pdf

1、羌活為傘形科植物羌活Notopterygium incisum Ting ex H.T.Chang或?qū)捜~羌活Notopterygium forbesii Boiss.的干燥根莖及根,獨(dú)活為傘形科植物重齒毛當(dāng)歸Angelicapubescens Maxim.f.biserrata Shan et Yuan的干燥根,兩者作為常用中藥收載于《中國藥典》2005年版(一部)。由于兩者來源相近、功效相似、外觀性狀差異不大,致使商品市場和臨床用藥中

2、極易混淆。本研究收集了17個(gè)不同產(chǎn)地的羌活和獨(dú)活藥材,通過所含揮發(fā)油量的差異和GC、HPLC指紋圖譜方法對兩者進(jìn)行了比較,對羌活和獨(dú)活藥材的鑒別和質(zhì)量控制進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。
　　 揮發(fā)油和香豆素類成分為羌活和獨(dú)活的主要藥效成分。本研究測定了17批不同產(chǎn)地羌活和獨(dú)活藥材中揮發(fā)油的量。然后采用GC-FID法建立了兩者揮發(fā)油的指紋圖譜,使用DB-1毛細(xì)管氣相色譜柱(30 m×0.25 mm×0.25μm),采用程序升溫,在65min內(nèi)

3、,柱溫從50℃以8℃·min-1升至85℃(保持12 min),以4℃·min-1升至155℃(保持18 min),再以12℃·min-1升至250℃(保持5 min),檢測器溫度為270℃。對17批羌活和獨(dú)活藥材揮發(fā)油進(jìn)行指紋圖譜分析,結(jié)果表明兩者具有較大差異。將羌活GC指紋圖譜所得數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析,以夾角余弦(Cosine)作為樣品相似性測度。17批羌活分為3類,第Ⅰ類為推薦品,第Ⅱ、Ⅲ類為非推薦品(包括劣品和偽品),選?、耦惖?5

4、批藥材建立共有模式,采用藥典委員會(huì)推薦的色譜指紋圖譜處理軟件,計(jì)算樣品與共有模式之間的相似度,0.85以上者為羌活推薦藥材；同法17批獨(dú)活分為4類,第Ⅰ類為推薦品,第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ類為非推薦品,選?、耦惖?1批藥材建立共有模式并計(jì)算相似度,0.85以上者為獨(dú)活推薦藥材。將羌活樣品GC指紋圖譜代入獨(dú)活GC共有模式計(jì)算相似度,最高者只有0.39:將獨(dú)活樣品GC指紋圖譜代入羌活GC共有模式計(jì)算相似度,最高者也只有0.52。結(jié)果表明GC指紋圖譜方法

5、可以準(zhǔn)確地鑒別羌活與獨(dú)活藥材,同時(shí),通過兩者揮發(fā)油量的差異可進(jìn)一步對兩者進(jìn)行鑒別。
　　 本研究建立了羌活與獨(dú)活的HPLC指紋圖譜方法,采用Diamonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm、),流動(dòng)相為甲醇:乙腈(1:1)(A)-0.03％磷酸水溶液(B),梯度洗脫程序?yàn)?0～30 min,20％～46％A:30～46 min,46％～48％A；46～48 min,48％～72％A；48～60 min,72％A；

6、60～62min,72％～95％A；62～70 min,95％A,檢測波長320 nm。對17批羌活和獨(dú)活藥材進(jìn)行指紋圖譜分析,結(jié)果表明兩者具有顯著差異。將羌活HPLC指紋圖譜所得數(shù)據(jù)進(jìn)行聚類分析,17批羌活分為3類,第Ⅰ類為推薦品,第Ⅱ、Ⅲ類為非推薦品,選?、耦惖?批藥材建立共有模式并計(jì)算相似度,0.85以上者為羌活推薦藥材；17批獨(dú)活分為5類,第Ⅰ類為推薦品,第Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ類為非推薦品,選取Ⅰ類的13批藥材建立共有模式并計(jì)算相似度

7、,0.85以上者為獨(dú)活推薦藥材。將羌活樣品HPLC指紋圖譜代入獨(dú)活HPLC共有模式計(jì)算相似度,最高者只有0.22；將獨(dú)活樣品HPLC指紋圖譜代入羌活HPLC共有模式計(jì)算相似度,最高者只有0.11。結(jié)果表明HPLC指紋圖譜方法可以準(zhǔn)確地鑒別羌活與獨(dú)活藥材。
　　 本研究將GC和HPLC指紋圖譜方法相結(jié)合,共同對收集的羌活和獨(dú)活藥材進(jìn)行質(zhì)量評價(jià),并對兩者進(jìn)行比較和鑒別,方法簡便快速、科學(xué)可靠,為兩者在臨床應(yīng)用中的區(qū)分和質(zhì)量控制提供了