知母藥材多維色譜指紋圖譜研究.pdf

1、在中藥現(xiàn)代化的進程中，中藥指紋圖譜技術(shù)能比較全面地反映藥材地內(nèi)在質(zhì)量，用代表中藥藥效學物質(zhì)基礎(chǔ)的化合物群所表征的指紋圖譜來綜合評價中藥質(zhì)量，符合中醫(yī)理論和中藥化學成分，已經(jīng)成為國際認可的控制中藥或天然藥物質(zhì)量的最有效的手段，成為國家相關(guān)部門促進中藥質(zhì)量標準現(xiàn)代化大力推行的技術(shù)之一。中藥指紋圖譜研究工作目前是國內(nèi)中藥現(xiàn)代化研究的熱點之一。 本課題根據(jù)指紋圖譜研究的現(xiàn)狀，特別是針對指紋圖譜特別是多維指紋圖譜以及指紋圖譜評價存在的問題

2、，以知母藥材作為研究對象，進行了知母藥材多維指紋圖譜的研究以及指紋圖譜評價方法的比較研究，收集了多個不同產(chǎn)地或批號的藥材，考察確立知母藥材的前處理條件和高效液相色譜法/二極管陣列檢測器/蒸發(fā)光散射檢測器聯(lián)用(HPLC/DAD/ELSD)的色譜條件，建立了知母藥材中雙苯吡酮類和知母皂苷類物質(zhì)等的含量測定方法，采用兩張色譜圖表征不同成分，紫外檢測方法測定藥材中的雙苯吡酮類成分，ELSD檢測方法測定其中基本無紫外吸收的皂苷類成分，首次實現(xiàn)HP

3、LC/DAD/ELSD聯(lián)用一個系統(tǒng)對知母藥材中兩類不同具有不同檢測性質(zhì)共6個成分的含量測定，建立的前處理方法簡單有效。 多維指紋圖譜可以很好的解決由于單一模式進行中藥指紋圖譜的研究的局限性。通過優(yōu)化的適用于三種檢測系統(tǒng)的通用色譜條件，利用HPLC-DAD-ELSD和高效液相色譜法/二極管陣列檢測器/質(zhì)譜檢測器(HPLC/DAD/MSD)兩種聯(lián)用方式建立了知母藥材DAD、ELSD以及MSD檢測的多維指紋圖譜，分別應(yīng)用三種圖譜對藥材

4、進行了相似度的評價，同時對質(zhì)譜檢測的總離子流圖進行了提取離子，獲得的提取離子流指紋圖譜具有更好的特征性，最后綜合所得的多維光譜色譜信息，建立了藥材多維指紋圖譜特征。針對獲得的多維指紋圖譜具有多個評價指標的缺點，首次提出了多維融合指紋圖譜的概念，同時通過應(yīng)用活性物質(zhì)的校正因子作為權(quán)重因子的方法進行了知母多維指紋圖譜的融合研究，得到了藥材的權(quán)重相似度，使三個評價指標轉(zhuǎn)化為一個指標，能夠直觀地進行藥材的質(zhì)量評價。 針對對相似度應(yīng)用于中

5、藥質(zhì)量評價的缺點作了研究。采用模式識別的方法進行知母DAD檢測和ELSD檢測指紋圖譜的評價研究，采用與知母藥材性質(zhì)較為相近的知母提取物和藥材同時進行研究，對相似度評價結(jié)果、聚類分析以及主成分分析等評價結(jié)果的優(yōu)劣作出了比較，得到的結(jié)果證實了相似度評價結(jié)果具有一定的局限性，而主成分分析方法可以準確對藥材的真?zhèn)蝺?yōu)劣進行判別。 針對目前中藥中化學成分多數(shù)未知的情況，本課題利用已有的兩類成分共6個對照品通過應(yīng)用液相/多級質(zhì)譜(LC-MSn