豬沙門氏菌耐藥基因檢測方法的建立及其應(yīng)用.pdf

1、沙門氏菌是一種重要的人畜共患病的病原菌，其分布廣，危害大，動(dòng)物沙門氏菌是世界各地人類食物中毒的主要致病菌。由于臨床上抗生素的不合理使用及一些飼料抗生素添加劑的使用，使沙門氏菌逐漸產(chǎn)生了耐藥性，耐藥性的形成對(duì)臨床治療來說是一個(gè)很棘手的問題。一旦產(chǎn)生耐藥性，原本一些有效的藥物便不能達(dá)到治療的效果，從而使病情加重甚至危及生命，由于細(xì)菌有多種產(chǎn)生耐藥的機(jī)制，且耐藥性可以傳播并且傳播速度很快，這種耐藥性可以通過殘留在畜產(chǎn)品中的藥物經(jīng)過食物鏈而傳染

2、給人，這嚴(yán)重影響著我國畜牧業(yè)的發(fā)展，同時(shí)也影響著人類的身體健康。因此，預(yù)防和控制耐藥性的產(chǎn)生和傳播有著非同一般的意義，如果能及早地檢測出耐藥性，進(jìn)行細(xì)菌耐藥的分子檢測無疑是一種快捷、簡便的方法。本試驗(yàn)針對(duì)沙門氏菌及沙門氏菌的耐藥性進(jìn)行了以下工作： 1、從臨床沙門氏菌病發(fā)病豬中分離了41株沙門氏菌。 2、對(duì)臨床分離株進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，確定了規(guī)模化豬場致病性沙門氏菌韻耐藥情況。 3、參照GenBank上已經(jīng)發(fā)布的抗性基因

3、序列，設(shè)計(jì)了48對(duì)引物，擴(kuò)增出了五類抗菌藥物的11種抗性基因（OXA-1，aadA1，aadA2,aadB,aph（3′）-Ⅱ，aacC2，cat1，tetB，dhfrxⅡ，dhfrⅧ，dhfrⅦ），初步闡明了該五種抗生素抗性基因的分子流行病學(xué)規(guī)律。 4、建立了檢測四環(huán)素、氯霉素、氨基糖甙類與甲氧胺嘧啶的PCR檢測方法，包括tet（B）、cat⒈、aacC2、aadA2、dhfrXⅡ、dhfrⅧ的PCR檢測，PCR陽性檢測率與藥