植物乳桿菌的鑒定及生物學特性的研究.pdf

1、本試驗以源自內蒙古呼和浩特嬰兒及乳牛糞便，并已經過商品抗生素耐性試驗后選出的10株菌為試材，進行合成維生素B6能力的篩選試驗。其中4株菌B25、B72、B76和N59-1合成維生素B6的能力較高。同時對合成維生素B6能力較高的4株菌株進行耐酸性、耐膽鹽試驗。結果表明，4株菌對酸和膽鹽的耐受能力有所不同，其中N59-1對酸和膽鹽的耐受性較其它3株菌較高。而且在人工胃液和腸液的耐受性試驗中，N59-1在pH值3的人工胃液保持3h，存活率為8

2、9.33％，再從胃液轉移到腸液保持3h后，N59-1的存活率仍大于80％，其它三株菌的存活率低于80％。直到24h后，N59-1仍有一定的活菌數(shù)，存活率為77.20％，活菌對數(shù)值為7.45。 在傳統(tǒng)的生化鑒定的基礎上，進一步利用分子生物學方法對菌株N59-1進行了16S rDNA基因的擴增與測序，并將結果與乳桿菌標準菌株的16S rRNA/DNA基因序列作同源性分析，建立系統(tǒng)發(fā)育樹。結果表明，菌株N59-1與標準菌株L.plan

3、tarum JCM1149的同源性為99.7％，結合系統(tǒng)發(fā)育樹分析及16S rDNA部分序列分析，可將菌株N59-1判定為L.plantarum，這與生理生化等傳統(tǒng)分類鑒定方法所得結果基本一致。 對鑒定為植物乳桿菌的N59-1進行灌胃小白鼠的致病性試驗，結果表明試驗菌株N59-1對小鼠無致病性，是安全的。同時通過正交試驗優(yōu)化植物乳桿菌N59-1的增菌培養(yǎng)基，結果表明，用優(yōu)化的MRS增菌培養(yǎng)基培養(yǎng)植物乳桿菌，培養(yǎng)終止時間為8h，活