

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:動(dòng)物實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),預(yù)先給予短時(shí)、輕微、不至于引起神經(jīng)元損傷的腦缺血,可以保護(hù)神經(jīng)元,使其能夠耐受其后通常會(huì)引起神經(jīng)元損傷的較嚴(yán)重的腦缺血,這一現(xiàn)象被稱為腦缺血耐受,預(yù)先給予的短時(shí)、輕微、不至于引起神經(jīng)元損傷的腦缺血稱為腦缺血預(yù)處理。自1990年Kitagawa首先提出腦缺血預(yù)處理可以誘導(dǎo)腦缺血耐受以來,大量的研究證實(shí)了它的存在,但其發(fā)生機(jī)制目前尚未闡明。我室既往研究表明,腦缺血預(yù)處理通過引起膠質(zhì)細(xì)胞谷氨酸轉(zhuǎn)運(yùn)體-1(glial glu
2、tamate transporter-1, GLT-1)大量表達(dá)而誘導(dǎo)腦缺血耐受。但腦缺血預(yù)處理通過怎樣的機(jī)制或哪些信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑引起GLT-1大量表達(dá),尚有待闡明。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察在體腦缺血耐受誘導(dǎo)過程中,過氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisome proliferators activated receptor, PPAR)、核轉(zhuǎn)錄因子-κB(Nuclear factor kappaB, NF-κB)信號(hào)通路是否在腦缺血預(yù)處理所誘
3、導(dǎo)的腦缺血耐受過程中發(fā)揮作用,為進(jìn)一步研究腦缺血預(yù)處理是否通過PPARγ/NF-κB誘導(dǎo)GLT-1蛋白表達(dá)上調(diào)而發(fā)揮腦保護(hù)作用奠定基礎(chǔ)。
方法:健康雄性Wistar大鼠(280-320g)110只,采用四血管閉塞法(Four-vessel occlusion,4VO)制造大鼠全腦缺血模型。通過Western-blot法檢測缺血預(yù)處理后不同時(shí)間點(diǎn)PPARγ蛋白及NF-κBP50蛋白的表達(dá)變化;硫堇染色觀察海馬組織病理學(xué)改變,
4、觀察PPARγ的抑制劑GW9662及NF-κB的抑制劑BAY11-7082是否能夠劑量依賴性地阻斷腦缺血預(yù)處理所誘導(dǎo)的腦缺血耐受。
結(jié)果:
1.腦缺血預(yù)處理上調(diào)PPARγ蛋白的表達(dá)通過Western blot研究腦缺血預(yù)處理對(duì)PPARγ蛋白表達(dá)的影響。腦缺血預(yù)處理后,即刻時(shí)間點(diǎn)即0min和15min時(shí)間點(diǎn)PPARγ蛋白的表達(dá)量較少,IOD值分別為0.20±0.03、0.21±0.02。PPARγ蛋白在胞核中的
5、表達(dá)于30min時(shí)間點(diǎn)明顯升高,IOD值為0.49±0.03,于3h時(shí)間點(diǎn)表達(dá)達(dá)高峰,IOD值為0.52±0.02,后逐漸降低。與即刻時(shí)間點(diǎn)相比,30min及3h蛋白表達(dá)明顯上調(diào),差異有顯著性(P<0.01);其余時(shí)間點(diǎn)均無顯著差異(P>0.05)。
2.腦缺血預(yù)處理上調(diào)NF-κBP50蛋白的表達(dá)通過Western blot研究腦缺血預(yù)處理對(duì)NF-κBP50蛋白表達(dá)的影響。腦缺血預(yù)處理后,即刻時(shí)間點(diǎn)即0minNF-κBP5
6、0蛋白的表達(dá)量較少,IOD值為0.20±0.03,15min、30min時(shí),IOD值分別為0.24±0.02、0.26±0.03,與即刻時(shí)間點(diǎn)相比,均無顯著差異(P>0.05)。NF-1CBP50蛋白在胞核中的表達(dá)于3h明顯升高,IOD值為0.68±0.04,于6h時(shí)間點(diǎn)表達(dá)達(dá)到高峰,IOD值為0.86±0.04。與即刻時(shí)間點(diǎn)相比,3h及6h組NF-κBP50蛋白表達(dá)顯著升高(P<0.01),其余時(shí)間點(diǎn)均無顯著差異(P>0.05)。
7、r> 3.PPARγ的特異性抑制劑GW9662劑量依賴性阻斷腦缺血預(yù)處理所誘導(dǎo)的腦缺血耐受硫堇染色顯示,sham組大鼠海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元排列致密整齊,形態(tài)規(guī)則完整,細(xì)胞核飽滿,核仁清晰,HG為0級(jí),ND為210.67±11.02(ce1l/mm,下同)。CIP組大鼠海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元未見明顯損傷,ND為202±12.17,與sham組相比,HG及ND均無明顯差異。Ⅱ組大鼠錐體細(xì)胞幾乎全部死亡,HG分級(jí)為Ⅱ-Ⅲ級(jí)、ND為24
8、.0士8.0,與sham組相比,HG顯著升高(P<0.01),ND顯著降低(P<0.01)。CIP+Ⅱ組大鼠海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元形態(tài)依然完整,僅個(gè)別錐體細(xì)胞缺失或胞核固縮,與Ⅱ組相比,HG顯著降低(P<0.01),ND顯著增高(P<0.01)。DMSO+CIP+Ⅱ組與CIP+Ⅱ組相比無明顯差異。1.25nmmol GW9662+CIP+Ⅱ組,大鼠海馬CA1區(qū)錐體神經(jīng)元細(xì)胞部分死亡,HG分級(jí)為Ⅰ級(jí),ND為111.33±7.57,與DMS
9、O+CIP+Ⅱ組相比,HG顯著增高(P<0.01),ND顯著降低(P<0.01)。2.5nmol GW9662+CIP+Ⅱ組,錐體神經(jīng)元成片死亡,HG分級(jí)為Ⅱ級(jí),ND為81.33±7.02,與1.25nmolGW9662+CIP+Ⅱ組相比有顯著差異(P<0.01)。5nmol GW9662+CIP+Ⅱ組,幾乎全部錐體神經(jīng)細(xì)胞死亡,HG分級(jí)為Ⅲ級(jí),ND為26.67±4.61,與2.5nmol GW9662+CIP+Ⅱ組相比有顯著差異(P<
10、0.01)。上述結(jié)果表明,PPARγ的特異性抑制劑GW9662劑量依賴性阻斷腦缺血預(yù)處理所誘導(dǎo)的腦缺血耐受。
4.NF-κB的特異性抑制劑BAY11-7082劑量依賴性阻斷腦缺血預(yù)處理所誘導(dǎo)的腦缺血耐受硫堇染色顯示,Sham組、CIP組、Ⅱ組、CIP+Ⅱ組、DMSO+CIP+Ⅱ組結(jié)果均同第3部分結(jié)果。0.625nmol BAY11-7082+CIP+Ⅱ組,錐體神經(jīng)元部分死亡,HG分級(jí)為Ⅰ級(jí),ND為105.33±10.07,
11、與DMSO+CIP+Ⅱ組相比,HG顯著增高(P<0.01),ND顯著降低(P<0.01)。1.25nmol BAY11-7082+CIP+Ⅱ組,錐體神經(jīng)元細(xì)胞成片死亡,HG分級(jí)為Ⅱ級(jí),ND為54.67±7.57,與0.625nmol BAY11-7082+CIP+Ⅱ組相比有顯著差異(P<0.01)。2.5nmol BAY11-7082+CIP+Ⅱ組,幾乎全部錐體神經(jīng)元死亡,HG分級(jí)為Ⅲ級(jí),ND為26.67±4.61,與1.25nmol
12、BAY11-7082組相比有顯著差異(P<0.01)。以上結(jié)果表明NF-κB的特異性抑制劑BAY11-7082劑量依賴性阻斷腦缺血預(yù)處理所誘導(dǎo)的腦缺血耐受。
結(jié)論:
1.腦缺血預(yù)處理可以使胞核內(nèi)PPARγ蛋白的表達(dá)上調(diào)。
2.腦缺血預(yù)處理可以使胞核內(nèi)NF-κBP50蛋白的表達(dá)上調(diào)。
3.PPARγ的特異性抑制劑GW9662劑量依賴性阻斷腦缺血預(yù)處理所誘導(dǎo)的腦缺血耐受。
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- p38 MAPK-PPARγ-NF-κB信號(hào)通路在腦缺血預(yù)處理誘導(dǎo)的腦缺血耐受中的作用.pdf
- 腦缺血預(yù)處理誘導(dǎo)腦缺血耐受過程中NF-κBP50、NF-κBP65以及PPARγ蛋白的表達(dá)變化.pdf
- NF-κB信號(hào)通路在膠質(zhì)瘤放療耐受中的作用及機(jī)制研究.pdf
- Notch信號(hào)通路在七氟烷預(yù)處理誘導(dǎo)腦缺血耐受中的作用及機(jī)制研究.pdf
- NF-κB通路在神經(jīng)母細(xì)胞瘤侵襲轉(zhuǎn)移過程中的作用及其機(jī)制.pdf
- NF-κB在腦缺血預(yù)處理激活p38MARK上調(diào)GLT-1表達(dá)誘導(dǎo)腦缺血耐受中發(fā)揮作用.pdf
- 紫草素在口腔鱗癌NF-κB信號(hào)通路中作用機(jī)制的研究.pdf
- NF-κB信號(hào)通路在幽門螺桿菌致病機(jī)制中的作用的研究.pdf
- PI3K-Akt信號(hào)通路在電針預(yù)處理誘導(dǎo)腦缺血耐受中的作用研究.pdf
- NF-κB在鼠疫菌毒力蛋白YopE致病過程中作用機(jī)制的研究.pdf
- 在腦缺血預(yù)處理誘導(dǎo)腦缺血耐受過程中p38MAPK在星形膠質(zhì)細(xì)胞的表達(dá).pdf
- PRRSV調(diào)控NF-κB信號(hào)通路的機(jī)制研究.pdf
- NF-κB、Doublecortin在腦缺血預(yù)處理介導(dǎo)神經(jīng)保護(hù)效應(yīng)中的作用.pdf
- 腦缺血耐受大鼠中TLR4、NF-κB及TRIF表達(dá)的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 吡格列酮(Pioglitazone)對(duì)大鼠局灶性腦缺血的保護(hù)作用及其PPARγ依賴性抑制NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的機(jī)制.pdf
- PPARγ、NF-κB、NF-α在慢性缺血性腎病大鼠模型中表達(dá)及意義.pdf
- NF-κB在腦缺血再灌注后腦組織局部炎癥反應(yīng)中的作用.pdf
- Carmal在T細(xì)胞受體引起NF-κB激活過程中作用和機(jī)制研究.pdf
- miR-199a在大鼠腦缺血耐受過程中的表達(dá)和作用.pdf
- p38MAPK在腦缺血耐受誘導(dǎo)過程中大鼠海馬中的表達(dá).pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論