Crocin對人膀胱癌T24細(xì)胞的抑制作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的：研究Crocin對人膀胱癌T24細(xì)胞株是否具有抑制作用，并進(jìn)一步作機(jī)制探討，為Crocin作為一種高效無毒的天然藥物治療膀胱癌奠定理論基礎(chǔ)。 方法：④體外培養(yǎng)人膀胱癌T24細(xì)胞株。Crocin處理后，應(yīng)用MTT實(shí)驗(yàn)觀察細(xì)胞毒性作用，倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)改變，流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞周期變化和細(xì)胞凋亡，RT-PCR和Westemblot檢測Bcl-2、Bax表達(dá)。②建立人膀胱癌T24細(xì)胞株裸鼠移植瘤動(dòng)物模型。Crocin處理后，

2、觀察其對腫瘤的抑制作用，光鏡、電鏡觀察腫瘤組織形態(tài)改變，RT-PCR檢測Bcl-2、BaxmRNA表達(dá)，SP-免疫組織化學(xué)法分析Bcl-2、Bax、survivin、CyclinDl蛋白表達(dá)。 結(jié)果：①體外實(shí)驗(yàn)：MTT結(jié)果顯示Crocin呈劑量依賴性和時(shí)間依賴性抑制人膀胱癌T24細(xì)胞的生長；光鏡觀察Crocin處理后T24細(xì)胞出現(xiàn)凋亡的形態(tài)學(xué)改變；流式細(xì)胞術(shù)顯示Crocin對細(xì)胞周期的影響存在時(shí)間依賴性，并呈明顯的G0/Gl期阻

3、滯現(xiàn)象，細(xì)胞凋亡率隨Crocin作用時(shí)間的延長逐漸增加；RT-PCR和Westemblot的檢測結(jié)果顯示T24細(xì)胞經(jīng)Crocin處理后，其Bcl-2的表達(dá)水平下降，而Bax的表達(dá)水平上調(diào)。②動(dòng)物實(shí)驗(yàn)：Crocin對人膀胱癌裸鼠移植瘤的生長具有抑制作用，抑制率達(dá)28．7％。用藥期間裸鼠生長良好，表明Crocin無明顯的毒副作用；光鏡顯示經(jīng)Crocin處理后腫瘤標(biāo)本內(nèi)出現(xiàn)片狀壞死灶；電鏡觀察可見各期凋亡細(xì)胞及凋亡小體；RT-PCR檢測結(jié)果顯