SLE患者外周血單個核細胞Tim-1及Tim-3基因的表達以及人Tim-3基因的克隆.pdf

1、Tim(T cell immuglobulin domain and mucin domain)基因編碼的蛋白是一類具有共同基序的跨膜糖蛋白，其基本結構包括一個信號肽、免疫球蛋白樣區(qū)、粘蛋白樣區(qū)、跨膜區(qū)和有磷酸化位點的胞內(nèi)區(qū)。Tim家族位于人染色體5q32.2，共包括3個基因，分別是Tim-1，Tim-3及Tim-4。Tim家族可能是Th1/Th2特異性表面標志，參與Th細胞的分化及免疫應答調(diào)節(jié)；Tim-1細胞主要表達在分化后的Th2細

2、胞上，Tim-3只表達在分化后的Th1細胞上；Tim家族在自身免疫病中表達變化及SNP研究提示其參與自身免疫病發(fā)生。 系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)是一種典型的自身免疫病，其特征是產(chǎn)生大量自身抗體和多系統(tǒng)受累。該病病因不明，以T細胞依賴性B細胞克隆活化和產(chǎn)生自身抗體、形成多種免疫復合物而導致組織損害為特征。Th細胞及其細胞因子在自身免疫病發(fā)病機制中有著非常重要的作用。有不少學者

3、認為SLE是Th2型自身免疫病，但也有相反的觀點，認為SLE患者血清中IFN-γ水平顯著增加，而且Th1占優(yōu)勢可加速狼瘡向自身免疫性疾病發(fā)展。Tim-1、Tim-3是否參與其中發(fā)生目前尚未見報道。 本研究通過熒光實時定量RT-PCR及半定量RT-PCR檢測SLE患者外周血單個核細胞(peripheral blood monoculear cells，PBMC)Tim-1、Tim-3及其他相關因子的表達水平，探討Tim-1、Tim

4、-3表達與SLE相關性，并研究Tim分子的表達動力學，為進一步闡明SLE的發(fā)病機制及Tim與SLE的關系奠定基礎。為進一步開展Tim-3相關研究，本研究的另一部分工作是克隆人Tim-3基因，為將來進一步表達并更深入研究該基因準備條件。第一部分sLE患者外周血單個核細胞Tim-1及Tim-3基因的表達 目的：通過熒光實時定量RT-PCR、半定量RT-PCR分析系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者與健康對照者PBMC中Tim-1、Tim-3及其他相

5、關細胞因子的表達差異，為進一步闡明SLE的發(fā) 病機制及Tim與SLE的關系奠定基礎。 結論：SLE患者PBMC中Tim-1mRNA表達顯著升高，與IL-lOmRNA表達呈正相關，提示SLE為Th2型自身免疫??；同時SLE患者PBMC中與免疫抑制相關的因子FoxP3及TGF-βl mRNA表達顯著降低，Tim-3配體galactin-9表達顯著升高，且T淋巴細胞增殖能力降低，提示SLE患者Thl/Th2失衡可能與上述因素有關。