CysLT受體在LPS誘導的小膠質細胞炎癥和氧化應激反應中的調節(jié)作用.pdf

1、半胱氨酰白三烯（CysLTs）是中樞重要的炎癥介質，CysLTs通過作用其受體(CysLT1R和CysLT2R)發(fā)揮效應。最近的研究發(fā)現(xiàn)，CysLT1R和CysLT2R調節(jié)腦缺血神經炎癥。但是，CysLTR是否調節(jié)帕金森?。≒D）相關的小膠質細胞炎癥和氧化應激尚待研究。
　　本項目擬在小膠質細胞激活劑脂多糖（LPS）誘導的BV2小膠質細胞模型，研究CysLT1R和CysLT2R在LPS誘導的小膠質細胞炎癥和氧化應激反應中的調節(jié)作用

2、，并初步探討其信號轉導。旨在闡明CysLTR作為PD神經炎癥治療靶點的意義。
　　方法：
　　在小鼠小膠質細胞系BV2細胞培養(yǎng)，觀察小膠質細胞激活劑LPS處理BV2細胞后前炎癥細胞因子和氧化應激產物改變；進一步檢測LPS誘導的BV2細胞CysLT1R，CysLT2R和ERK信號通路相關蛋白表達變化；在上述實驗模型，評價CysLT1R拮抗劑montelukast，CysLT2R拮抗劑HAMI3379和ERK1/2抑制劑U012

3、6對LPS誘導的小膠質細胞炎癥和氧化應激的作用。
　　結果：
　　第一部分 CysLTR介導LPS誘導的小膠質細胞炎癥和氧化應激
　　為闡明CysLT1R和CysLT2R是否參與小膠質細胞炎癥和氧化應激反應，我們在BV2細胞培養(yǎng)觀察了LPS誘導的改變。研究發(fā)現(xiàn)，LPS誘導BV2細胞前炎癥細胞因子TNF-α和氧化應激產物iNOS、 NO以及ROS增加。LPS也濃度依賴性的誘導BV2小膠質細胞CysLT1R和CysLT2R

4、表達上調。CysLT1R受體拮抗劑montelukast和CysLT2R選擇性拮抗劑HAMI3379有效抑制LPS誘導的BV2細胞前炎癥細胞因子和氧化應激產物。這些結果提示CysLTR在LPS誘導BV2小膠質細胞炎癥和氧化應激反應中起關鍵作用。
　　第二部分 ERK1/2信號通路參與CysLTR介導的小膠質細胞炎癥和氧化應激
　　為初步探討 CysLTR參與 PD小膠質細胞激活的信號轉導，在 LPS誘導的BV2細胞模型，我們

5、觀察了ERK1/2信號通路相關蛋白P-ERK和EGR-1的表達改變以及CysLT1R，CysLT2R拮抗劑和ERK1/2抑制劑的作用。研究表明，LPS誘導P-ERK和即早蛋白EGR-1表達上調。ERK1/2抑制劑U0126抑制LPS增加的P-ERK和EGR-1表達，減少LPS誘導的小膠質TNF-α、iNOS、 NO和ROS產物。CysLT1R拮抗劑montelukast和CysLT2R拮抗劑HAMI3379也抑制LPS誘導的P-ERK和

6、EGR-1表達上調。結果提示ERK1/2信號通路參與CysLTR介導的小膠質細胞炎癥和氧化應激反應。
　　結論：
　　1.在BV2小膠質細胞，CysLT1R和CysLT2R介導LPS誘導的小膠質細胞炎癥和氧化應激，小膠質細胞因子TNF-α和氧化應激產物iNOS、 NO和ROS增加。LPS誘導ERK1/2磷酸化和EGR-1表達增加。
　　2. CysLT1R拮抗劑montelukast，CysLT2R拮抗劑HAMI337