SERINC家族蛋白抑制HIV--1復(fù)制的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、絲氨酸整合因子SERINC(Serine incorporater,Ser)是一種膜蛋白家族,其中家族成員Ser5是最新報(bào)道能夠被攜帶到人類(lèi)免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)病毒粒子中的宿主限制性因子,具有抵抗HIV-1病毒感染性的作用,而HIV-1編碼的輔助蛋白Nef可以拮抗Ser5。但目前Ser5抗病毒活性具體機(jī)制還不明確,本課題為內(nèi)源性Ser5在宿主細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)狀況以及Ser5抗病毒的分子機(jī)理研究,對(duì)艾滋病疫苗及治療方法的開(kāi)發(fā)具有重要

2、的借鑒意義。本研究首先將Ser家族各成員對(duì)HIV-1感染性的抑制效果進(jìn)行了驗(yàn)證,結(jié)果顯示只有Ser5能夠明顯抑制HIV-1的感染性。其次通過(guò)對(duì)Ser5序列的分析及數(shù)據(jù)庫(kù)檢索發(fā)現(xiàn),其具有5個(gè)轉(zhuǎn)錄剪接體,分別是Ser5-001、Ser5-004、Ser5-005、Ser5-008a和Ser5-008b。Ser5-001具有10個(gè)跨膜區(qū),而其他轉(zhuǎn)錄剪接體缺乏C末端最后一個(gè)跨膜區(qū)。在HIV-1靶細(xì)胞的巨噬細(xì)胞系、T細(xì)胞系、原代外周血單核細(xì)胞等不

3、同細(xì)胞中利用RT-qPCR技術(shù)對(duì)內(nèi)源性Ser5表達(dá)水平的分析結(jié)果表明,Ser5-001內(nèi)源性表達(dá)最強(qiáng),其mRNA水平比其他轉(zhuǎn)錄剪接體至少高10倍。為了確定Ser5抗病毒活性的關(guān)鍵功能域,對(duì)Ser5-001從C端根據(jù)其跨膜區(qū)結(jié)構(gòu)進(jìn)行依次截短,對(duì)截短后Ser5的抗病毒活性進(jìn)行驗(yàn)證,結(jié)果顯示,去掉最后一個(gè)跨膜區(qū)后截短突變體即不具有抗病毒感染性的活性,以上結(jié)果表明Ser5-001 C端第10個(gè)跨膜區(qū)對(duì)其發(fā)揮抗病毒感染性具有重要作用。另外,利用C

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