cIAP2蛋白抑制乙型肝炎病毒復制的分子機制研究.pdf

1、專業(yè)病原生物學復旦大學博士研究生學位論文cIAPZ蛋白抑制乙型肝炎病毒復制的分子機制研究Meehanism(s)oftheinhibitionofHBVrePlieationbyeellularinhibitorofaPoPtosisProteinZ博士研究生導師導師組成員王澤坤袁正宏研究員瞿滌研究員顧建新教授—J日睡卜產(chǎn)，二.門〕」仁萬—.資矛——上卜四月復旦大學生物醫(yī)學研究院本課題承國家基礎研究基金伽0.2009cB522504)、

2、國家傳染病防治重大專項(N0.ZooszXloZo3)資助博士學位論文中文摘要博士學位論文中文摘要博士研究生王澤坤導師袁正宏cIAPZ蛋白抑制乙型肝炎病毒復制的分子機制研究乙型肝炎病毒(HePatitisBvirus，HBv)是一種嚴重危害人類健康的病原體。己有的研究結果表明病毒和宿主的相互作用決定著病毒感染清除或持續(xù)性感染的建立。在HBV感染的清除過程中，機體可通過腫瘤壞死因子一a(TllmneerosisfactalPha，TNF一

3、a)、干擾素詳(Interferonganuna，IFN一丫)、干擾素一a(Interferonalpha，IFN一a)、干擾素一p(Interferonbeta，IFN一p)等細胞因子介導的非殺細胞方式抑制HBV復制，然而這些細胞因子調控的抗病毒基因尚未完全闡明。本室前期通過基因芯片等技術篩選TNF一a誘導的效應基因，發(fā)現(xiàn)細胞凋亡抑制蛋白2(cellularinhibitofaPoptosisproteinZ，cIAPZ)具有抑制HB

4、v復制的效應，但其具體的抗病毒機制尚未完全闡明。本研究首先在pCMVHBV復制系統(tǒng)中驗證cIAPZ的抗病毒效應。研究結果顯示，dAPZ并不影響HBV前基因組RNA的水平和衣殼蛋白的合成，但cIAPZ顯著下調了HBV復制中間體DNA的水平。siRNA干擾內源性dAPZ的表達后，轉入HBV復制型質粒，檢測內源性表達的dAPZ對HBV基因表達和復制的影響。研究結果顯示，下調內源性。IAPZ的表達可明顯增強HBV的復制，而并不影響病毒轉錄的RN

5、A和合成的衣殼蛋白。上述結果提示cIAPZ可能影響了HBV前基因組RNA逆轉錄成DNA過程中的某個環(huán)節(jié)。為明確cIAPZ抑制HBV的功能區(qū)域，構建了cIAPZ的不同缺失突變體。將HBv復制型質粒和。IAPZ截短突變體共轉細胞，檢測病毒的基因表達和復制情況。研究結果顯示，逐步缺失d”2蛋白N一端的三個BIR結構域，cIAPZ的抗病毒效應有不同程度的削弱，但當缺失C一端的CARD和RING兩個結構域后，cI妙2的抗病毒效應完全消失。己知RI