DSPP、Enamelin基因片斷的克隆及其在牙胚的表達檢測.pdf

1、牙齒的發(fā)育與其他器官相似，也是依賴于預定牙齒發(fā)生部位的上皮組織與其下方的間充質(zhì)之間的相互誘導而發(fā)生的，經(jīng)過一系列有序和交互的作用，牙上皮分化為成釉質(zhì)細胞，而間充質(zhì)細胞分化為成牙本質(zhì)細胞，各自合成分泌基質(zhì)蛋白并最終形成牙釉質(zhì)和牙本質(zhì)。 牙釉質(zhì)和牙本質(zhì)作為牙齒的代表性結(jié)構(gòu)，可作為牙胚發(fā)育分化的形態(tài)學指標，檢測成釉質(zhì)細胞和成牙本質(zhì)細胞的發(fā)育分化則可以從細胞生物學水平判斷牙胚的發(fā)育分化情況。細胞的組織形態(tài)結(jié)構(gòu)可以作為細胞發(fā)育分化的依據(jù)，

2、但檢測細胞的分化情況僅從組織學、形態(tài)學水平檢測遠遠不夠，必須建立分子水平的檢測方法。為此，本實驗克隆了人和小鼠的DSPP、Enamelin基因片斷，然后制備特異性的人和小鼠DSPP、Enamelin基因片斷的mRNA反義探針，再將其分別與人或小鼠含有成牙本質(zhì)細胞或成釉質(zhì)細胞的牙胚組織進行原位雜交，檢測DSPP、Enamelin基因表達情況以此確定我們制備的4個探針的組織特異性及種屬特異性，進而建立一種從基因轉(zhuǎn)錄水平檢測人、小鼠成牙本質(zhì)細