冠狀動脈微栓塞致心肌細胞凋亡及其內(nèi)質(zhì)網(wǎng)途徑激活的研究.pdf

1、目的:探討大鼠冠狀動脈微栓塞后心肌細胞凋亡及其內(nèi)質(zhì)網(wǎng)凋亡途徑激活的動態(tài)變化規(guī)律. 方法;隨機選取成年雄性SD大鼠，夾閉升主動脈10s，經(jīng)左心室注射42 μm微栓塞球(3000個/0.1ml)，建立大鼠冠狀動脈微栓塞模型，設(shè)為微栓塞組(CME組)；以注射生理鹽水為假手術(shù)組(S組)。每組存活大鼠按不同觀察時間點隨機分為3h、6h、12h、24h、4w組，每組10例。另取10只大鼠作正常對照組。末端脫氧核糖核酸轉(zhuǎn)移酶介導的dUTP切口

2、末端標記技術(shù)(TLJNEL)檢測心肌細胞凋亡，western blot檢測Caspase-12酶原及其活化產(chǎn)物Caspase-12的表達，熒光酶標法檢測Caspase-12的活性。心臟超聲檢測左心室射血分數(shù)(LVEF)。 結(jié)果:(1)與正常對照組、相應S組比較，CME組心肌細胞凋亡指數(shù)(AI)顯著升高(均P<0.05)，凋亡主要分布在微梗死區(qū)及其邊緣區(qū)。CME組AI在3h、6h、12h、24h、4w分別為(1.76±O.68)％

3、、(3.17±1.26)％、(1.34±0.12)％、(1.07±0.65)％、(0.30±O.13)％，3h AI開始升高，6h AI達最高(均P<0.05)，12h AI開始下降，4w AI已顯著下降(均P<0.05)。(2)與正常對照組、相應S組比較，CME組Caspase-12的相對活化水平顯著升高(均P<0.05)，CME組Caspase-12的相對活化水平在3h開始升高，6h達高峰(均P<0.05)，12h開始下降，4w已顯

4、著下降(均P<0.01)，其隨時間變化規(guī)律與心肌細胞AI隨時間變化規(guī)律一致。CME組Caspase-12的相對活化水平與心肌細胞AI呈顯著正相關(guān)(3h組：r=0.806，P=0.024；6h組：r=0.912，P=0.010；12h組：r=0.803，P=0.028；24h組：r=0.796，P=0.033；4w組：r=0.605，P=0.046)。(3)與正常對照組、相應S組比較，CME組LVEF顯著下降(均P<0.05)，CME組心

5、肌細胞AI與LVEF呈顯著負相關(guān)(3h組：r=-0.780,P=0.036；6h組：r=-0.862,P=0.013;12h組：r=-0.811,P=0.040;24h組：r=-0.803，P=0.042；4w組：r=-0.675，P=0.040)。 結(jié)論:冠狀動脈微栓塞致心肌細胞凋亡顯著增加，具有動態(tài)變化規(guī)律。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)凋亡途徑可能參與了冠狀動脈微栓塞致心肌細胞凋亡。冠狀動脈微栓塞后心肌細胞凋亡可能是冠狀動脈微栓塞致心肌損傷的重要機