人臍帶間充質(zhì)干細胞來源的微囊通過誘導(dǎo)HGF促進人腎癌細胞的生長和遷移侵襲能力.pdf

1、目的：
　　初步探討人臍帶間充質(zhì)干細胞來源的微囊（hWJMSC-MVs）對人腎癌細胞(RCC）的影響及其可能的作用機制。
　　方法：
　　1、選用人腎癌細胞株786-O作為研究對象，分三組進行干預(yù)：
　?。?）+MVs組，（2）control組，（3）+RNase-MV組（經(jīng)RNA酶處理的MV），24h、48h后檢測腫瘤細胞增殖率（CCK-8）及細胞周期，進行劃痕實驗檢測。運用實時定量PCR檢測腎癌細胞中MMP-

2、2、MMP-9基因的表達情況。
　　2、裸鼠皮下注射腎癌細胞建立腎癌移植瘤模型，每三天測量一次腫瘤大小，計算各組腫瘤面積及發(fā)生率，36d后進行犧牲，分別進行免疫組化分析（HGF、KI-67及Tunel）。
　　3、運用Western blot技術(shù)檢測各組腎癌標本中MMP-2、MMP-9、cyclinD1的蛋白表達情況。然后檢測各組腎癌細胞或腫瘤標本中HGF、c-MET、ERK1/2、AKT蛋白表達情況，并對c-MET抑制劑干

3、預(yù)后的腎癌細胞中p-ERK1/2、p-AKT蛋白表達情況進行檢測。
　　結(jié)論：
　　hWJMSC-MVs促進了腎癌的生長及侵襲能力，其作用機制可能是MVs誘導(dǎo)HGF的增加從而增強了PI3k-AKT及Ras/MAPK（ERK1/2）信號通路的活化，進一步加強了腎癌細胞增殖及抗凋亡的能力。同時發(fā)現(xiàn)MV經(jīng)RNA酶處理后喪失了進一步促進腎癌生長的能力，證明MVs對靶細胞的作用可能是通過傳遞有效的遺傳物質(zhì)（mRNA/miRNA）來實現(xiàn)