過度內質網(wǎng)應激在大鼠慢性環(huán)孢素A腎毒性模型細胞凋亡中的作用機制.pdf

1、目的：探討過度內質網(wǎng)應激在大鼠慢性環(huán)孢素A（Cy-closporine A，CsA）腎毒性模型細胞凋亡中的作用機制。
　　方法：將Sprague-Dawley（SD）大鼠隨機分為正常對照組和慢性CsA腎毒性組，分別給予皮下注射橄欖油（1mL/kg/d，對照組）和CsA（15mg/kg/d，毒性組）1周及4周后處死大鼠。通過末端脫氧核苷酸轉移酶介導的dUTP缺口末端標記測定法（TUNEL染色法）及 Masson染色評估腎小管間質纖維

2、化和細胞凋亡；使用免疫組化學染色和免疫印跡依次檢測分子免疫球蛋白結合蛋白（Bip）、磷酸化的真核細胞翻譯起始因子2α（elF2α）、生長抑制DNA損傷基因153（GADD153）、細胞凋亡相關基因caspase-12及caspase-3蛋白表達。
　　結果：與對照組比較，CsA注射1周觀察不到腎小管間質纖維化和TUNEL陽性細胞，而給予 CsA注射4周大鼠表現(xiàn)為明顯的腎小管間質纖維化[(38.9±3.3)％vs.(0.0±0.0)

3、%，P<0.01]和大量 TUNEL陽性細胞[(89±9)% vs.(7±2)%，P<0.01]。在分子水平上，與對照組比較，CsA注射組Bip和caspase-12蛋白的表達1周達到高峰，4周后降至正常水平；反之，elF2α、GADD153、caspase-3蛋白表達呈時間依賴性的增加。
　　結論：在慢性CsA腎毒性中，過度的內質網(wǎng)應激耗盡Bip,凋亡前途徑中elF2α、GADD153、caspase-12，caspase-3的