缺血性腦卒中治療的實驗和臨床初步研究.pdf

1、第一部分經頸動脈途徑移植神經干細胞治療缺血性腦卒中的初步實驗研究 第一節(jié)改良線栓法制備大鼠局灶性腦缺血再灌注模型 目的：建立一種簡便可靠、創(chuàng)傷較小的大鼠局灶性腦缺血再灌注模型. 方法：主要參照Zea Longa的線栓法,適當加以改進,制作SD大鼠的右側大腦中動脈閉塞2小時后再灌注模型,進行神經功能評估和病理組織學檢查,以觀察模型的可靠性. 結果：25例手術建模的大鼠中,2例(8﹪)于拔栓線時突發(fā)死亡,迅速

2、開顱取腦發(fā)現顱底腦池內有大量血塊,2例于術后第2天死亡,1例于術后第7天死亡,總死亡率為20﹪,其余的均成功建成大腦中動脈閉塞/再灌注模型,并在隨后的14天觀察過程中神經功能狀況逐漸改善;手術建模中栓線插入長度對大鼠體重呈線性回歸關系(P=3.86×10<'-9>);病理HE染色可見模型組大鼠的右側額頂葉和尾殼核區(qū)域腦組織缺血性損傷改變,神經元皺縮,呈不規(guī)則形態(tài),胞漿嗜酸性,胞核深染或消失,細胞間質疏松. 結論：本實驗改良法制備

3、的大鼠大腦中動脈閉塞/再灌注模型簡便易行,創(chuàng)傷較小,穩(wěn)定性較好,是用于研究局灶性腦缺血再灌注較為理想的實驗動物模型. 第二節(jié)經頸動脈途徑移植神經干細胞治療缺血性腦卒中的初步實驗研究 目的：研究經頸動脈途徑移植神經干細胞(NSCs)治療大鼠腦缺血再灌注模型的效果以及移植NSCs在大鼠腦內的狀況. 方法：從懷孕14～16天的SD大鼠(其細胞均為綠色熒光標記)的胚胎大腦和脊髓組織中分離、培養(yǎng)NSCs;采用線栓法制作大鼠

4、的大腦中動脈閉塞/再灌注(MCAO/R)模型;將大鼠隨機分為MCAO/R+NSCs移植組(8只)、MCAO/R+培養(yǎng)液(DFNG)注射組(8只)和正常大鼠+NSCs移植組(5只),MCAO/R+NSCs移植組和MCAO/R+DFNG注射組于建模后24小時經同側頸內動脈分別注射NSCs和DFNG;對三組大鼠進行神經功能評估,在手術建模后14天(移植后13天)處死大鼠進行病理組織學檢查,并采用免疫熒光方法觀察移植的NSCs在大鼠腦內存活、分

5、布和分化情況. 結果：整個觀察過程中,正常大鼠+NSCs移植組大鼠始終未出現神經功能障礙,MCAO/R+NSCs移植組和MCAO/R+DFNG注射組大鼠手術建模后均出現明顯的神經功能障礙,在隨后14天的觀察過程中神經功能狀況逐漸改善,在移植早期兩組大鼠的神經功能評分無顯著性差異,在移植后期(手術建模后10天和14天)MCAO/R+NSCs移植組大鼠的神經功能狀況要優(yōu)于MCAO/R+DFNG注射組(P值分別為2.40×10<'-5

6、>和1.45×10<'-5>);病理HE染色顯示,MCAO/R+NSCs移植組和MCAO/R+DFNG注射組可見在右側大腦中動脈供應的額頂葉和尾殼核區(qū)域腦組織的缺血性損傷改變,而正常大鼠+NSCs移植組的腦組織結構正常;免疫熒光染色發(fā)現,MCAO/R+NSCs移植組可見有移植的NSCs存活、分布于缺血損傷的額頂葉和尾殼核區(qū)域,并有部分移植的NSCs開始朝著神經元方向分化,個別移植的NSCs則開始朝著星形膠質細胞方向分化;而正常大鼠+NS

7、Cs移植組和MCAO/R+DFNG注射組的大鼠中均未發(fā)現有這些現象. 結論：經頸動脈途徑移植NSCs治療缺血性腦卒中,可見有移植的NSCs存活、分布于缺血損傷區(qū)域,并朝神經元和星形膠質細胞方向分化來進行神經修復,從而改善神經功能障礙. 第二部分血管內支架成形術治療癥狀性主動脈弓上顱外動脈狹窄 目的：總結血管內支架成形術治療癥狀性主動脈弓上顱外動脈狹窄的短期療效和安全性. 方法：從2003年2月至2007年