乳香揮發(fā)油肝靶向脂質(zhì)體的制備及藥效學(xué)的研究.pdf

1、本項(xiàng)研究旨在系統(tǒng)研究乳香揮發(fā)油脂質(zhì)體的處方及成型工藝，確定工藝參數(shù)；建立脂質(zhì)體的質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)體系及脂質(zhì)體中藥物含量和包封率的分析方法；建立實(shí)體瘤動(dòng)物模型，比較分析乳香揮發(fā)油、脂質(zhì)體以及陽(yáng)性藥物5-Fu的抗癌效果。 本課題首先對(duì)脂質(zhì)體中藥物含量和主要質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)包封率的測(cè)定及方法學(xué)進(jìn)行研究。在揮發(fā)油化學(xué)成分不明確的條件下，首次采用UV和GC法對(duì)揮發(fā)油進(jìn)行定量。所建立的兩種方法準(zhǔn)確、精密且具有互補(bǔ)性。同時(shí)采用非傳統(tǒng)的分離手段-萃取法

2、對(duì)脂質(zhì)體中的游離藥物和包封在內(nèi)的藥物進(jìn)行了分離，分離效果好，為后續(xù)工作奠定了良好基礎(chǔ)。 采用乙醇注入-超聲法制備乳香揮發(fā)油脂質(zhì)體，通過(guò)單因素考察，運(yùn)用正交試驗(yàn)以包封率(E％)為指標(biāo)對(duì)處方和工藝進(jìn)行優(yōu)化。試驗(yàn)結(jié)果表明，卵磷脂：膽固醇質(zhì)量比為6:1，卵磷脂：揮發(fā)油質(zhì)量比為6:1，制備溫度為60℃時(shí)，脂質(zhì)體的包封率(E％)最高，平均包封率為87.7±1.23％。驗(yàn)證三批脂質(zhì)體的包封率結(jié)果表明制備工藝穩(wěn)定。通過(guò)對(duì)脂質(zhì)體的外觀、顯微形態(tài)學(xué)

3、、平均粒徑、pH值、Zeta電位、沉降穩(wěn)定性、包封率和滲漏率等質(zhì)量的考察，乳香揮發(fā)油脂質(zhì)體各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)達(dá)到制劑設(shè)計(jì)要求。根據(jù)所建立的質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)和方法，單因素考察和正交試驗(yàn)分別采用采用UV和GC法測(cè)定脂質(zhì)體的包封率。 首次采用Balb/c-nu裸鼠移植瘤模型，評(píng)價(jià)乳香揮發(fā)油脂質(zhì)體的體內(nèi)抗腫瘤作用。試驗(yàn)結(jié)果表明，揮發(fā)油脂質(zhì)體低、中、高劑量藥物組均能有效地抑制人肝癌(HepG2)裸鼠移植瘤生長(zhǎng)，其中，中劑量藥物組(187.5μg·1

4、09-1，i.p)對(duì)移植瘤的作用強(qiáng)度與已經(jīng)應(yīng)用于臨床的5-Fu注射液相當(dāng)，藥物組對(duì)瘤生長(zhǎng)大小的影響呈現(xiàn)出劑量依賴性。動(dòng)物耐受評(píng)價(jià)包括血液生化學(xué)檢測(cè)和骨髓像檢測(cè)，結(jié)果表明，動(dòng)物耐受性較好。首次運(yùn)用病理技術(shù)，進(jìn)行BCB實(shí)驗(yàn)組、BCB脂質(zhì)體實(shí)驗(yàn)組和陰性、陽(yáng)性對(duì)照組的HE染色對(duì)比。同時(shí)，首次采用免疫組化技術(shù)，研究增殖核抗原(PCNA)、血管內(nèi)皮因子(VEGF)和血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1(CD-31)在HepG2中的表達(dá)。試驗(yàn)結(jié)果表明，乳香揮發(fā)

5、油和其脂質(zhì)體對(duì)肝癌HepG2細(xì)胞具有抑制增殖的作用。 本項(xiàng)研究成功建立了測(cè)定BCB脂質(zhì)體中藥物含量和包封率的分析方法和質(zhì)量評(píng)價(jià)體系；利用正交試驗(yàn)篩選出處方和工藝的最佳組合，固化了制備工藝參數(shù)；Balb/C-nU裸鼠移植瘤模型實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，揮發(fā)油脂質(zhì)體低、中、高劑量藥物組均能有效地抑制人肝癌(HepG2)裸鼠移植瘤生長(zhǎng)，藥物組對(duì)瘤生長(zhǎng)大小的影響呈現(xiàn)出劑量依賴性；免疫組化試驗(yàn)結(jié)果表明，乳香揮發(fā)油和其脂質(zhì)體對(duì)肝癌HepG2細(xì)胞具有抑制