大腸癌肝轉移組織中胸苷磷酸化酶的表達.pdf

1、研究背景： 胸苷磷酸化酶(TP)是DNA合成過程中的關鍵酶，已證實與血小板衍化內皮生長因子(PD-ECGF)為同種物質，還能在組織內轉化5’-脫氧氟尿苷(5’-DF(JR)為5-氟尿嘧啶(5-FU)發(fā)揮選擇性細胞抑制作用。因此TP對惡性腫瘤的生長、轉移、預后及臨床治療均有重要意義。近年的研究普遍認為在結直腸癌組織中TP主要由腫瘤間質細胞特別是腫瘤相關巨噬細胞(TAM)表達，組織中TP活性與患者預后相關。肝臟是結直腸癌晚期轉移的主

2、要器官，目前國內外關于結直腸癌肝轉移組織中TP表達的研究尚未見報道。本實驗通過對28例結直腸癌肝轉移標本進行免疫組織化學染色，研究人結直腸癌肝轉移組織中TP的表達及其與TAM之間的相互關系，以及TP陽性細胞數與患者預后之間的關系。 材料與方法： 1、臨床標本：人結直腸癌肝轉移標本28例取自廣州醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院普外科1996年9月至2005年12月的手術標本。其中男性20例，女性8例。年齡最大78歲，最小21歲，平均56

3、歲。其中低分化癌2例，中分化癌24例，高分化癌2例。 2、抗體和試劑盒：一抗采用小鼠抗TP單克隆抗體654-1(1∶800)、小鼠抗TP單克隆抗體抗1C6-203(1∶400)，此2抗體由日本Roche Research Center提供。巨噬細胞標記物CD68的單克隆抗體PG-Ml(1∶lOO)，購自DAKO公司。以小鼠非特異性抗體IgGI(1∶100)為陰性對照。染色過程中所需的SP-2001試劑盒、二抗試劑盒、DAB試劑盒

4、均購自美國Vector公司。 3、染色結果的判定及細胞計數方法：654-1和1C6-203抗體的陽性細胞表現為細胞核或細胞質棕黃色染色，偶爾也可見到單獨細胞核黃染。CD68陽性細胞染色位于細胞膜呈鐵銹色。先在低倍視野下選擇5處陽性細胞最密集區(qū)，然后分別在400倍視野下(0.0625mm<'2>)下進行計數，然后分別計算出每種陽性細胞的x±s。 4、統(tǒng)計學分析：應用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件包對數據進行Spearman相