牙髓干細胞應用于肌腱-韌帶組織再生的體內外研究.pdf

1、肌腱/韌帶是連接肌肉/骨骼和骨骼的規(guī)則致密結締組織，并起到傳遞張力負載的作用。肌腱/韌帶組織自身修復能力有限，受損后無法恢復原有的機械力學性能，且伴隨有大量疤痕組織增生，引起嚴重的功能紊亂和殘疾，導致關節(jié)運動異常和疼痛。傳統(tǒng)的治療理療方法只能緩解疼痛，而手術治療如手術縫合、自體或異體移植方法雖有一定效果，但是療效有限，即使是自體肌腱移植修復液只能達到正常肌腱力學性能的40％左右，且伴隨著大量瘢痕組織增生。同時，這些治療方法都存在不可避免

2、的并發(fā)癥，例如供體區(qū)的受損、疾病的傳播、移植物的免疫排斥反應、反復發(fā)生的肌腱撕裂等問題。在過去的20年隨著生物材料學及臨床醫(yī)學的不斷發(fā)展，肌腱組織工程研究取得很大的進步，為缺損肌腱的修復提供一條嶄新的可行性途徑。
　　近年來，通過利用干細胞復合支架材料構建人工組織以促進受損組織再生，為肌腱組織的再生帶來了全新的希望。肌腱組織工程技術臨床轉化前需迫切解決的三個關鍵問題：1）獲得足夠量且具有腱系分化能力的種子細胞；2）具有誘導腱系分化

3、性能的生物材料；3）有利于種子細胞分化的力學刺激或適合的生態(tài)環(huán)境，如加生長因子。然而，目前這些問題尚未完全解決，影響了肌腱組織工程的發(fā)展，從而制約了組織工程肌腱在臨床用于肌腱缺損再生修復治療。所以，本論文針對這三個問題，立足于本研究室前期的干細胞與生物材料相關研究成果，進行了成系列的研究，最終目的為運用牙髓干細胞與生物支架構建組織工程肌腱，為實現(xiàn)肌腱的再生打下良好的實驗基礎。
　　本論文研究內容包含：第一部分分離培養(yǎng)了人成體牙髓干

4、細胞，并證實其均具有克隆形成能力和多向分化潛能等干細胞特性；第二部分比較牙髓組織和肌腱組織中肌腱/韌帶相關的蛋白表達情況，發(fā)現(xiàn)牙髓組織中高表達肌腱/韌帶相關的蛋白，特別是在成牙本質細胞層；同時發(fā)現(xiàn)分離培養(yǎng)的牙髓干細胞也有部分肌腱相關膠原蛋白的強表達；第三部分研究PGA復合支架誘導牙髓干細胞的相互作用，發(fā)現(xiàn)平行排列聚乙醇酸材料與牙髓干細胞有較好的生物相容性，會激發(fā)牙髓干細胞向腱系分化，且肌腱/韌帶相關的基因表達不斷增高；并適合作為肌腱組織