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文檔簡介
1、目的:研究臍帶間充質干細胞(MSC)的免疫調節(jié)作用。 方法:建立貼塊法分離培養(yǎng)臍帶MSC的方法,對細胞的一般形態(tài)、免疫表型和分化能力進行鑒定;建立NOD/SCID小鼠的異種移植物抗宿主病(X—GVHD)模型,給予模型小鼠尾靜脈共輸注MSC,觀察輸注后小鼠的體重、血象和病理改變確定MSC抑制X—GVHD的效果,并在此基礎上對MSC抑制X—GVHD的機制作進一步探討。 結果:①成功采用貼塊法分離培養(yǎng)的臍帶MSC。從臍帶組織周
2、圍爬出的短梭形的細胞是一群非內皮(CD31),非造血(CD45和CD34),僅表達一些細胞黏附分子(CD105,CD44,CD29,CD73)的干細胞群體。它表達HLA—ABC和PD—L1,不表達CD80、CD86和HLA—DR,經誘導能向脂肪和成骨細胞分化。②應用臍血單個核細胞尾靜脈輸注建立NOD/SCID小鼠的X—GVHD模型,發(fā)現MSC共輸注明顯減輕X—GVHD癥狀(體重減輕、弓背、腹瀉等),改善靶器官(肝臟、腎臟、脾臟和肺臟)的
3、病理損傷。MSC輸注雖然降低了骨髓、脾臟和周血中人源細胞的植入(p<0.05),但明顯抑制了骨髓、脾臟和周血中人T細胞的增殖(p<0.05),提高了CD4+/CD8+T細胞比值。③樹突狀細胞和T細胞是GVHD的效應細胞。MSC下調單核細胞誘導的樹突狀細胞成熟標志CD83,CD86,HLA—DR的表達,減少IL-12p70的分泌,抑制樹突狀細胞對T細胞的特異性細胞毒活性(p<0.05)。在特異性抗原刺激下,臍帶MSC影響T細胞的細胞周期;
4、上調活化Th細胞的比例,下調活化Tc細胞的比例,上調活化Th/Tc比值;抑制T細胞及其亞群Th和Tc細胞的增殖;上調T細胞FoxP3基因的表達;促進細胞因子TGF-β1和IL—6的分泌,抑制細胞因子IL-10的分泌(p<0.05)。細胞接觸在臍帶MSC與T細胞的相互作用不起主要作用。 結論:貼塊法獲得的臍帶MSC具有免疫調節(jié)作用,能抑制X—GVHD,可能是通過抑制樹突狀細胞的成熟,抑制T細胞及亞群的增殖,上調Th細胞的活化,下調
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