白藜蘆醇對大鼠視網膜缺血再灌注損傷的神經保護作用及保護機制.pdf

1、研究目的：
　　 視網膜缺血與許多眼部疾病的發(fā)生發(fā)展存在聯系，比如視網膜血管阻塞性疾病，新生血管年齡相關性黃斑變性，增生性糖尿病視網膜病和青光眼等，這些眼部疾病對視力存在嚴重的威脅。白藜蘆醇是一種存在于紅酒中的多酚化合物，有很強的抗氧化的能力，在腦缺血灌注損傷、小鼠視網膜血管退行性損傷及體外視神經病變中都起到神經保護作用。本次研究將主要驗證白藜蘆醇是否對大鼠視網膜缺血再灌注損傷有保護作用，并且進一步探討其保護機制。本論文從兩個方

2、面進行研究:
　　 1.大鼠視網膜缺血再灌注損傷模型的建立及白藜蘆醇的神經保護作用。
　　 2.白藜蘆醇對于大鼠視網膜缺血再灌注損傷神經保護作用的機制。
　　 研究方法：
　　 1.大鼠視網膜缺血再灌注損傷模型的建立及白藜蘆醇的神經保護作用
　　 在本研究中我們采用的損傷模型是Wistar大鼠高眼壓模型，即對大鼠的視網膜采用高壓（120mmHg）壓迫（造成缺血損傷），持續(xù)時間是60分鐘，再灌注的時

3、間是1天。應用熒光金染料逆行追蹤標記檢測視網膜神經節(jié)細胞存活的細胞數，實時定量聚合酶鏈反應(real-timePCR)及蛋白印記法檢測Thy-1的表達水平，視網膜電生理檢測b波振幅及b波比值的變化，免疫組織化學法檢測膽堿乙酰基轉移酶及波形蛋白的表達水平。
　　 2.白藜蘆醇對于大鼠視網膜缺血再灌注損傷神經保護作用的機制。
　　 應用實時定量聚合酶鏈反應(real-timePCR)及蛋白印記法檢測HO-1(血紅素氧化酶-1

4、)，MMP-9（基質金屬蛋白酶-9）及iNOS（誘導型一氧化氮合酶）的表達水平。
　　 研究結果：
　　 缺血再灌注損傷前給予溶劑會造成視網膜神經節(jié)細胞存活數目減少，Thy-1的mRNA/蛋白表達水平下降，視網膜電生理b波振幅及b波比值降低，無長突細胞胞體數目減少及神經纖維膽堿乙酰基轉移酶的熒光強度減弱，Müller細胞標志蛋白-波形蛋白的熒光強度增強，以及HO-1，MMP-9及iNOSmRNA/蛋白表達水平升高。在視網

5、膜缺血之前15分鐘給予實驗大鼠不同劑量的白藜蘆醇，可以呈劑量依賴性并且明顯地改變上述損傷變化。較缺血再灌注損傷組，白藜蘆醇給藥組視網膜神經節(jié)細胞存活數目增多，Thy-1的mRNA/蛋白表達水平上升，視網膜電生理b波振幅增加、b波比值升高，無長突細胞胞體數增多及神經纖維膽堿乙?；D移酶的熒光強度增強，Müller細胞標志蛋白-波形蛋白的熒光強度減弱，以及HO-1mRNA/蛋白表達水平更加升高，MMP-9及iNOSmRNA/蛋白表達水平下降