過量維甲酸致小鼠神經(jīng)管畸形及?；撬岣深A中Pax3、Cx43的特異時相表達.pdf

1、目的：探討小鼠胚胎神經(jīng)管畸形（NTDs）中過量維甲酸（RA）致畸及牛磺酸干預的作用，分析 Pax3、Cx43與神經(jīng)管畸形的關系及其時相表達特異性。
　　方法：本實驗采用健康首次受孕雌性昆明小鼠孕7.75天（E7.75）予以一次性灌胃維甲酸30mg/kg，畸形干預組從 E0開始孕鼠自由飲用?；撬?g/L自來水溶液，E7.75同致畸組處理，對照組常規(guī)飼養(yǎng)，E7.75灌服純橄欖油，建立胎鼠神經(jīng)管畸形及干預動物模型；各組母鼠20只，分別于

2、E9.5、E10.5、E11.5、E12.5剖宮取胎，應用免疫組織化學方法及逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應分析各組神經(jīng)管中Pax3、Cx43的表達水平，及特異時相性差異。
　　結果：（1）致畸組胎鼠表現(xiàn)為以腦膨出為主的NTDs，體型偏小，發(fā)育滯后，其總體畸形率高達71.6％（189/264），死胎或吸收胎率為11.4％（34/298）；干預組胎鼠顱骨閉合不全，腦膨出較致畸組輕微，畸形率55.3％（152/275），較致畸組明顯減少，P＜0.

3、05差異有顯著性，死胎或吸收胎率為9.8％（30/305），與致畸組比較P＞0.05，差異無顯著性。（2）各組神經(jīng)管中Pax3蛋白及mRNA表達情況：Pax3蛋白質(zhì)陽性反應主要位于胞核，均呈棕黃色。Pax3基因在對照組中表達強于兩實驗組（P＜0.05），且于E10.5出現(xiàn)表達高峰；在兩實驗組中Pax3表達隨胚胎發(fā)育呈現(xiàn)增強趨勢，干預組Pax3表達強于致畸組（P＜0.05）。（3）各組神經(jīng)管中Cx43蛋白及mRNA表達情況：Cx43蛋白質(zhì)

4、陽性反應主要位于細胞質(zhì)及細胞膜，均呈棕黃色。Cx43基因在對照組中表達弱于兩實驗組（P＜0.05），且都于E11.5出現(xiàn)表達高峰；干預組Cx43表達弱于致畸組（P＜0.05）。
　　結論：（1）該維甲酸致畸及?；撬岣深A動物模型穩(wěn)定可靠，適用先天性NTDs動物實驗的研究。（2）過量維甲酸引起Pax3、Cx43表達時相性紊亂，表現(xiàn)為Pax3表達減弱，未見表達高峰；Cx43表達增強，從而引起胎鼠NTDs，牛磺酸具有拮抗維甲酸致畸作用，改