BMP4在小鼠神經管畸形發(fā)生中的作用研究.pdf

1、本文研究目的：應用全反式維甲酸(all-trans-retinoic acid，ATRA)誘導建立小鼠神經管畸形(neuraltube defects，NTDs)動物模型，研究骨形成蛋白4(Bone morphogenetic protein 4，BMP4)與受體的相互作用關系及其介導的信號通路對NTDs發(fā)生發(fā)展的影響，探討B(tài)MP4在ATRA致。NTDs中的可能作用機制。 研究方法：選取健康成熟昆明種小鼠，通過孕7.25-7.5

2、天(E7.25-7.5d)時一次性胃飼50mg/kgATRA誘導建立NTDs動物模型，肉眼及解剖顯微鏡下觀察胎鼠畸形情況：通過半定量RT-PCR技術及原位雜交方法，檢測BMP4及其受體BMPR Ⅰ A、BMPR Ⅰ B、BMPR Ⅱ各基因在神經管閉合過程不同階段的表達情況；應用Western-blot方法對BMPs通路中的關鍵信號分子進行檢測，并對其進行綜合分析。 研究結果： 1．過量ATRA具有明顯的胚胎致畸性，可致孕

3、鼠子宮明顯充血淤血，造成無腦、脊柱裂等NTDs形態(tài)表現(xiàn)。 2．BMP4 mRNA在對照組和實驗組胚胎神經管組織中的表達均存在時間依賴性，并呈現(xiàn)隨時間而逐漸降低的變化，其Ⅰ型受體BMPRⅠA在實驗組胚胎神經管閉合過程中呈現(xiàn)隨時間穩(wěn)步增高的趨勢，BMPRⅠB先增高后大幅降低，Ⅱ型受體BMPRⅡ在整體上表達較穩(wěn)定，實驗組中的表達高于對照組。 3．在神經管閉合關鍵期，BMP4 mRNA主要表達于背側神經上皮，且實驗組水平高于對照

4、組。BMPs通路的信號分子p-Smadl蛋白表達水平在實驗組中高于對照組，而抑制型Smad6蛋白則在實驗組中低于對照組。 研究結論： 1．應用外源性ATRA成功誘導建立了昆明種小鼠NTDs動物模型，為研究NTDs發(fā)病機制奠定了重要的模型基礎。 2．BMP4在胚胎神經管閉合過程中可能具有部分誘導細胞凋亡的活性，其Ⅰ型受體與Ⅱ型受體在ATRA致NTDs中的作用不容忽視，可能為參與NTDs發(fā)生的分子調控過程的主要因素。