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文檔簡介
1、目的與意義:
觀察喹啉衍生物對前列腺癌PC3細胞的細胞間縫隙連接的作用,從細胞通訊水平探討細胞間縫隙連接對順鉑藥物作用的影響,研究該聯(lián)合治療方法對前列腺癌細胞的作用及可能機制,為臨床治療晚期前列腺癌提供新的方法和理論依據(jù)。
方法與材料:
取處于對數(shù)生長期的前列腺癌PC3細胞進行體外培養(yǎng),傳代后分別給予不同濃度水平的喹啉衍生物,聯(lián)合順鉑處理24h和48h兩個時間點,CCK8法檢測藥物作用后細胞的活力,實時熒光
2、定量 PCR法檢測細胞縫隙連接相關(guān)蛋白Cx43mRNA的表達及Western Blot檢測Cx43蛋白的表達。激光共聚焦檢測細胞間GJIC功能的變化。
結(jié)果:
CCK8法檢測結(jié)果顯示:在不同喹啉濃度組聯(lián)合順鉑處理PC3細胞24、48h后,前列腺癌PC3細胞的活力較單純順鉑處理組有明顯的不同。實時熒光定量PCR和Western Blot檢測結(jié)果顯示:喹啉不同濃度組聯(lián)合順鉑處理PC3細胞24h后,Cx43mRNA和蛋白都
3、有不同程度的升高。比較單獨使用順鉑時Cx43mRNA和蛋白表達水平差異具有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。激光共聚焦實驗結(jié)果顯示:前列腺癌PC3細胞GJIC功能有不同程度的增強,隨著藥物濃度增高,熒光染料在細胞縫隙連接的表達數(shù)量逐漸增多,熒光強度也隨之增大,并呈劑量效應(yīng)依賴關(guān)系和時間依賴效應(yīng)依賴關(guān)系。
結(jié)論:
喹啉衍生物可上調(diào)前列腺癌PC3細胞的細胞間縫隙連接 Cx43基因的mRNA及蛋白的表達水平并促進前列腺癌P
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