BMSCs移植治療腦出血損傷大鼠的實驗研究.pdf

1、分類號：R742密級：學位類別：科學學位口專業(yè)學位團學校代碼：10062學號：2010602735學科門類：醫(yī)學又肄簣科矢普零季裁樹Ji鞫MEDIe矗L0鞫lVERSllY碩士學位論文MASTER’SDISSERTATIoN論文題目：BMSCs移植治療腦出血損傷大鼠的實驗研究TITLEHumanumbilicalcordmesenchymalstemcellsTransplantationfortreatmentofcerebralhe

2、morrhageinjuryinrats一級學科：臨床醫(yī)學二級學科：神經(jīng)病學論文作者：杜從斌指導教師：王世民導師組成員：閻曉玲蘇心韓彤王新平天津醫(yī)科大學研究生院二。一三年五月天津醫(yī)科大學碩士學位論文中文摘要目的：研究BMSCs移植對大鼠出血性腦損傷后神經(jīng)功能恢復的影響，并探討其可能的治療機制。方法：采用密度梯度離心法結(jié)合貼壁篩選法分離綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因大鼠BMSCs。采用向成年雄性SD大鼠右側(cè)蒼白球立體定向注射膠原酶的方法誘導腦出血動物

3、模型，將實驗動物隨機分為鹽水組、模型組與移植組，模型組、移植組右側(cè)蒼白球各注射2ul用無菌生理鹽水稀釋的Ⅶ膠原酶，鹽水組注射等量生理鹽水。移植組造模后2h采用同樣方法移植BMSCs，鹽水組及模型組大鼠不做處理。采用mNSS神經(jīng)功能損傷程度評分法檢測大鼠神經(jīng)系統(tǒng)功能恢復情況，Morris水迷宮觀察比較大鼠移植前后的行為學變化，核磁共振掃描觀察大鼠移植后腦組織影像學改變。造模后1d、3d、7d、14d和28d處死大鼠，通過免疫組織化學法和E

4、LLISA法，觀察移植后的BMSCs在大鼠腦內(nèi)存活、分化情況和炎性因子、神經(jīng)營養(yǎng)因子等指標變化，以及對細胞凋亡的影響。結(jié)果：1通過密度梯度離心法結(jié)合貼壁篩選法分離大鼠BMSCs，經(jīng)流式細胞儀檢測所分離出的細胞，結(jié)果顯示細胞表達CD90和CD29，符合BMSCs的形態(tài)及細胞表面標志物等特性，并且可在體外進行分化、傳代、擴增，具有良好的自我更新能力和多向分化潛能，證實分離所得細胞為BMSCs；2，采用向大鼠右側(cè)蒼白球立體定向注射膠原酶的方法

5、誘導腦出血動物模型，大鼠神經(jīng)功能缺損明顯，造模后6h行MRI檢查，T1WI序列顯示右側(cè)紋狀體相應(yīng)層面小片狀低密度影，證實造模成功。3BMSCs移植后第1、3、7、14和28天，移植組mNSS評分低于模型組。4移植組大鼠TNFa表達和細胞凋亡水平均顯著降低，而BDNF蛋白的表達則顯著提高，腦組織可見極少量GFPNeuN、GFPGFAP陽性細胞。結(jié)論：(1)BMSCs可以在體外分離、培養(yǎng)、傳代、擴增。(2)采用SD大鼠右側(cè)蒼白球立體定向注射