多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥、耐消毒劑基因研究及同源性分析.pdf

1、目的：明確臨床分離的多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥基因的特點(diǎn)，并研究其對(duì)常用消毒劑的耐受機(jī)制。
　　方法：
　?。?）收集2009-2011年菌株做菌種鑒定，藥敏試驗(yàn)。
　　（2）進(jìn)行碳青霉烯酶篩選試驗(yàn)。
　?。?）用OXA-23、qacE△1、tnpU、aac6、ISAab1、bla OXA58、blaCTX-M、TEM-Q、SHV-Q、NDM-1等引物基因?qū)Τ樘岬幕蚪MDNA進(jìn)行擴(kuò)增，檢測(cè)耐藥基因。
　　（4

2、）用脈沖場(chǎng)凝膠電泳對(duì)采集自呼吸監(jiān)護(hù)病區(qū)的多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行同源性分析。
　　（5）NDM-1耐藥基因連接PMD18-T載體。
　?。?）觀(guān)察消毒劑含氯消毒劑和醋酸氯已定對(duì)63株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌（MDRAB）的殺滅效果。研究MDRAB耐消毒劑機(jī)制，研究MDRAB耐消毒劑基因的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　?。?）證實(shí)2009-2011年所收集的菌株為多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌，對(duì)常用7類(lèi)抗假單鮑菌藥物青霉素類(lèi)、頭孢菌素

3、類(lèi)、氨基糖甙類(lèi)、碳青霉烯類(lèi)、四環(huán)素類(lèi)、喹諾酮類(lèi)、磺胺類(lèi)中的至少5類(lèi)對(duì)應(yīng)的抗生素同時(shí)耐藥，耐藥率高達(dá)99％，表現(xiàn)為多重耐藥。
　?。?）碳青霉烯酶篩選試驗(yàn)顯示，耐藥菌株產(chǎn)碳青霉烯酶，陽(yáng)性率為67.7%。
　　（3）耐藥基因檢測(cè)顯示耐藥菌株8種耐藥基因陽(yáng)性。對(duì)aac6耐藥基因高度表達(dá)，陽(yáng)性率為93%；OXA23次之，陽(yáng)性率為87.1%；qacE△1為81.2%；tnpU陽(yáng)性率為78.3%；ISAab陽(yáng)性率為64.9%；TEM陽(yáng)性

4、率為62.8%；SHV陽(yáng)性率為21.1%；檢出一株NDM-1陽(yáng)性菌株。
　?。?）3株分離自呼吸監(jiān)護(hù)病區(qū)的菌株經(jīng) PFGE確證相似度較高，同源性高達(dá)87%。
　　（5）成功構(gòu)建PMD18-T-NDM-1載體。
　　（6）63株MDRAB菌株中,檢測(cè)出耐消毒劑基因qacE△1-sul147株，陽(yáng)性率為：74.6%。含氯消毒劑消毒濃度>5000 mg/L時(shí)，能殺滅所有試驗(yàn)菌株。當(dāng)醋酸氯已定濃度為4-8mg/L時(shí)，陰性菌株即