氟對中樞神經(jīng)系統(tǒng)CaMKⅡ基因和蛋白表達的影響.pdf

1、目的:研究氟對于人神經(jīng)母細胞瘤細胞（SH-SY5Y細胞）及發(fā)育期大鼠海馬區(qū)鈣/鈣調素依賴性蛋白激酶Ⅱα亞單位（α-CaMKⅡ）的基因及蛋白表達水平的影響。
　　方法:1、體外細胞試驗:體外培養(yǎng)SH-SY5Y細胞，在培養(yǎng)液中加入不同濃度的氟化鈉，使培養(yǎng)液中氟離子的終濃度分別為0.00 mmol/L，005 mmol/L，0.50mmmol/L，2.00 mmol/L及5.00 mmol/L，每組重復實驗3次（3瓶/組）。培養(yǎng)48h后

2、使用QRT-PCR檢測細胞α-CaMKⅡ的mRNA水平;使用Western blot技術測定α-CaMKⅡ的蛋白水平。
　　2、動物實驗:使12只SD大鼠按雌∶雄=3∶1自然交配，待乳鼠出生后1天(1d，day)，乳鼠及其哺乳大鼠一并隨機分為對照組、中、高劑量染氟組。幼鼠在出生后14天(P14 postnatal day)處死，每個劑量組8只幼鼠，急性分離幼鼠海馬，應用Western blot檢測上述部位α-CaMKⅡ的蛋白表達變

3、化。P28天重復試驗。
　　結果:1、體外實驗中，隨著培養(yǎng)液內氟離子濃度的升高，SH-SY5Y細胞α-CaMKⅡ的mRNA水平及蛋白水平依次降低，并呈現(xiàn)劑量-效應關系(P＜0.01)。
　　2、動物實驗中，P14乳鼠海馬區(qū)α-CaMKⅡ蛋白水平各實驗組均低于對照組(P＜0.01)，但實驗組間差異無顯著性(P=0.798);P28幼鼠海馬區(qū)α-CaMKⅡ蛋白水平隨著氟離子濃度的增加而依次降低，反應呈劑量-效應關系(P＜0.01