骨髓增生異常綜合征與線粒體細胞色素氧化酶基因突變.pdf

1、研究目的1.研究MDS線粒體細胞色素氧化酶基因COⅠ和COⅡ是否存在不同于正常組織的突變；2.這些突變是否存在熱點；3.發(fā)現(xiàn)新的單核苷酸多態(tài)性。 方法：18例MDS患者進入該項研究，年齡20～70歲，其中RA2例，RCMD3例，RAEB7例，RAEB-t/AML5例，MPD/MDS1例。分別提取MDS患者骨髓單個核細胞和頰粘膜細胞的總DNA，在文獻報道的突變熱點上下游80個堿基外設計引物，將線粒體細胞色素氧化酶基因COⅠ和COⅡ

2、用PCR方法擴增，得到528bp基因片斷，產(chǎn)物經(jīng)純化后測序，將結果與DNA文庫標準序列和患者自身正常組織對應序列比較，對突變結果進行分析。 結果：在所檢測的18例患者的線粒體細胞色素氧化酶基因COⅠ和COⅡ中長528bp的片斷中共發(fā)現(xiàn)2個單核苷酸多態(tài)性和一例單堿基插入，分別位7674T→C和7353A→G。插入突變?yōu)?702InsG，但該突變位于引物區(qū)，需進一步的試驗證實。 結論：1.根據(jù)我們的研究結果，沒有發(fā)現(xiàn)細胞色素