已閱讀1頁,還剩60頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、目的:糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一種由多因素引起的以慢性高血糖為特征的全身代謝性疾病。研究證實DM肺損害也是DM全身多系統(tǒng)病變的一部分,DM可顯著增加肺纖維化的風險。轉化生長因子-β1(transforming growth factorbeta1,TGF-β1)是促纖維化的細胞因子,在多種器官纖維化進程中扮演重要角色,而Smads蛋白作為TGF-β1下游主要的信號轉導分子,是TGF-β1由膜受體到核內目標基因

2、這一信號轉導途徑的中心環(huán)節(jié)。近年研究發(fā)現(xiàn),TGF-β1/Smad信號轉導途徑的過度激活與DM腎病以及非DM肺間質纖維化密切相關,而關于TGF-β1/Smad信號轉導通路與DM肺纖維化的研究尚少。羅格列酮是過氧化物酶體增殖物激活受體(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPAR-γ)的合成配體,PPAR-γ具有調節(jié)物質代謝、抗炎及抗纖維化作用。本研究通過應用HE染色、Masson染色觀察

3、肺組織結構變化及膠原沉積情況,應用免疫組織化學方法觀察DM狀態(tài)下肺組織TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7、Ⅰ型膠原(collagenⅠ,COLⅠ)、Ⅲ型膠原(collagenⅢ,COLⅢ)的表達變化情況,及羅格列酮干預后是否對DM肺損害有保護作用。
   方法:4周齡自發(fā)性2型糖尿病(T2DM)大鼠模型OLETF鼠30只,LETO大鼠8只為正常對照組(N組)。大鼠每四周行口服葡萄糖耐量試驗(Oral Glucose

4、 Tolerancerest,OGTT)。至30周齡時共有成模OLETF大鼠16只,隨機分為模型組(DM組)和羅格列酮干預組(RGT組)各8只。RGT組每日以3mg/kg的給藥劑量灌胃,DM組與N組以等量蒸餾水灌胃。各組均灌胃給藥12周。42周時經(jīng)股動脈放血處死大鼠,留取肺組織,10%中性福爾馬林固定后進行如下步驟:①HE染色觀察肺組織結構變化;②Masson染色觀察肺組織膠原沉積情況;⑨對肺組織進行TGF-β1、Smad2、Smad3

5、、Smad7、COLⅠ及COLⅢ免疫組織化學染色,光鏡下觀察TGF-β1、Smad2、Smad3、Smad7染色程度和陽性細胞百分率,運用圖像分析系統(tǒng)測定COLⅠ及COLⅢ平均光密度及陽性面積比。結果:①HE染色結果:N組大鼠肺泡結構正常,DM組大鼠肺組織結構紊亂,支氣管壁、肺泡間隔增厚,肺泡上皮細胞顯示不清,肺泡萎縮、塌陷,肺間質細胞外基質增多,并有炎癥細胞浸潤。RGT組肺組織病變較DM組減輕,但肺組織結構未恢復到正常。②Masson

6、染色結果:N組大鼠肺間質之間、血管周圍有少量膠原纖維。DM組大鼠肺間質、毛細血管周圍膠原纖維稍增多。RGT組肺組織膠原積聚減輕,然而結構未恢復至正常。④免疫組織化學分析:TGF-β1蛋白主要表達于支氣管黏膜上皮細胞、肺泡上皮細胞、血管內皮細胞、肺泡巨噬細胞、肺成纖維細胞的胞漿中。Smad2主要表達于巨噬細胞、成纖維細胞、血管內皮細胞、支氣管上皮細、胞肺泡上皮細胞胞漿及胞核中。Smad3主要表達于巨噬細胞、成纖維細胞、支氣管上皮細胞、肺泡

7、上皮細胞的胞漿及胞核中。Smad7主要表達于肺泡上皮細胞、支氣管上皮細胞、部分間質細胞中,多數(shù)為胞漿表達,少數(shù)為核漿同時表達。COLⅠ、COLⅢ主要分布于一些炎性細胞、肺間質內。DM組與N組比較,TGF-β1、Smad2、Smad3、COLⅠ、COLⅢ表達均增多,Smad7表達減少,差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01);RGT組與DM組比較,TGF-β1、Smad2、Smad3、COLⅠ、COLⅢ表達減少,Smad7表達增多,差異具有統(tǒng)計

8、學意義(P<0.01)。⑤Pearson相關性分析:TGF-β1與Smad2、Smad3、COLⅠ、COLⅢ陽性面積比及平均光密度正相關(r=0.649,0.714,0.974,0.948,0.932,0.879,P<0.01),與Smad7呈負相關(r=-0.822,P<0.01)。
   結論:①DM組大鼠肺組織病理改變和膠原纖維成分的沉積,表明肺臟是DM的又一靶器官。②DM組大鼠肺組織FGF-β1、Smad2、Smad3、

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論