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文檔簡介
1、目的:通過比較去甲腎上腺素誘導(dǎo)HSP70的表達(dá)對隱睪癥大鼠生殖細(xì)胞凋亡的影響,探討去甲腎上腺素對隱睪癥的治療作用與機(jī)制,為隱睪癥的臨床治療提供理論實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
方法:22日齡雄性SPF(specific pathogen-free animal)級SD大鼠96只,體重40~55g,經(jīng)隨機(jī)數(shù)字表處理后隨機(jī)分為3組:空白組A組(n=32)空白對照組,不采取任何干預(yù)措施;剩余兩組建立單側(cè)隱睪模型后分別施予不同干預(yù)措施,隱睪模型組B
2、組(n=32)隱睪模型生理鹽水處理組(按5ml/kg/d劑量腹腔注射給藥);隱睪模型藥物處理(用生理鹽水配成0.1mg/ml,按0.5mg/kg/d劑量腹腔注射給藥)組C組(n=32)。并于建立模型后的當(dāng)天,第5,10,15d按隨機(jī)的方法取出各組SD大鼠8只心臟穿刺采血3ml,作血清抗體分析用,然后斷頸處死SD大鼠迅速取出隱睪側(cè)睪丸稱重后,按常規(guī)方法石蠟包埋固定,標(biāo)記后留做HE染色觀查并檢測曲細(xì)精管生育力指數(shù)(tubular ferti
3、lityindex, TFI)、平均曲細(xì)精管直徑(mean tubular diametar,MTD),免疫組化,凋亡檢測用。
結(jié)果:
(1)各組大鼠隱睪側(cè)睪丸重量的變化:睪丸手術(shù)后5d時,B組睪丸重量就明顯下降(P<0.05),隨后持續(xù)下降,到15d時睪丸重量僅為A組的35%。C組變化較小,10d開始下降,與A組、B組的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
(2)各組大鼠血清抗精子抗體(AsA
4、b) IgG、IgA、IgM定量測定:睪丸手術(shù)后5d時,B組睪丸IgG和IgA水平開始升高(P<0.05),且隨著時間的延長,升高越明顯;而B組睪丸IgM水平手術(shù)后5d時就明顯上升(P<0.05),10d后開始下降。C組變化較小,與A組、B組的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),IgG和IgA水平手術(shù)后5d時升高不明顯,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),10d后開始上升,與A組、B組比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與A組、B組比較,有統(tǒng)
5、計(jì)學(xué)意義(P<0.05),但升高水平較B組低,而IgM水平手術(shù)后5d時就明顯上升(P<0.05),后隨時間延長逐漸降低。
(3)各組大鼠組織學(xué)觀察:B、C組MTD與TFI在手術(shù)后5d明顯降低,與A比較組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05), C組術(shù)后10d后MTD與TFI有所升高,與A組和B組比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
(4)各組大鼠細(xì)胞凋亡水平變化:B組于隱睪模型建立后在5d時就凋亡明顯增加(P<0.05
6、),且隨時間的延長逐漸增加,C組隱睪模型建立后在5d時就凋亡明顯增加(P<0.05),且隨時間的延長逐漸增加,但無B組明顯,與A組、B組比較,均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);
(5)各組大鼠Hsp70表達(dá)量變化:在A組睪丸組織中,Hsp70呈中等程度表達(dá)于精母細(xì)胞和精子細(xì)胞的細(xì)胞核內(nèi)。B組Hsp70于隱睪模型建立后在5d時就明顯減少(P<0.05),10d時減少達(dá)到高峰。到隱睪術(shù)后15d時,無明顯Hsp70表達(dá);C組Hsp
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